[发明专利]一种罗非鱼精子通用激活液及制备方法

摘要

一种罗非鱼精子通用激活液及制备，它由蔗糖、氯化钾、碳酸氢钠、氯化镁组成，其步骤：A、激活液母液的配制：(1)根据母液的浓度、体积和蔗糖分子量计算出配制母液需要的蔗糖重量，称取蔗糖，(2)根据母液的浓度、体积和氯化钾分子量计算出配制母液需要的氯化钾重量，称取氯化钾；(3)根据母液的浓度、体积和氯化镁分子量计算出配制母液需要的氯化镁重量；(4)根据母液的浓度、体积和碳酸氢钠分子量计算出配制母液的碳酸氢钠重量，将碳酸氢钠放入烧杯中，保存；B、精子稀释液的配制：从各组分母液中量取配制激活液所需体积的各组分、混合、放置冰箱、备用。配方合理，方法易行，操作简便，高于中华鲟精子激活液的渗透压，低于大口鲶精子激活液的渗透压。

主权项

1.一种罗非鱼精子通用激活液，它由以下重量份的原料制成：激活液渗透压为87.4～134.2mOsM，pH为8.0～9.0；一种罗非鱼精子通用激活液的制备方法，其步骤是：A、激活液母液的配制：(1)每毫升含蔗糖1mmol的母液：根据母液的浓度、体积和蔗糖分子量计算出配制母液的蔗糖重量，称取蔗糖，将蔗糖放入烧杯中，加入体积为配制母液体积二分之一的蒸馏水，使蔗糖溶解，将溶解后的蔗糖溶液倒入配制母液同样体积的容量瓶中，用蒸馏水洗涤3次，将洗涤后的蒸馏水也倒入容量瓶，最后用蒸馏水定容至容量瓶刻度处，蔗糖重量计算公式如下：溶质重量＝母液浓度×溶质分子量÷母液体积；(2)每毫升含氯化钾1mmol的母液：根据母液的浓度、体积和氯化钾分子量计算出配制母液需要的氯化钾重量，称取氯化钾，将氯化钾放入烧杯中，加入配制母液体积二分之一的蒸馏水，使氯化钾充分溶解，将溶解后的氯化钾溶液倒入配制母液同样体积的容量瓶中，用蒸馏水洗涤3次，将洗涤后的蒸馏水也倒入容量瓶，最后用蒸馏水定容至容量瓶刻度处；(3)每毫升含氯化镁0.5mmol的母液：根据母液的浓度、体积和氯化镁分子量计算出配制母液的氯化镁重量，称取氯化镁，将氯化镁放入烧杯中，加入体积为配制母液体积二分之一的蒸馏水，使氯化镁溶解，将溶解后的氯化镁溶液倒入配制母液同样体积的容量瓶中，用蒸馏水洗涤3次，将洗涤后的蒸馏水也倒入容量瓶，最后用蒸馏水定容至容量瓶刻度处；(4)每毫升含碳酸氢钠0.5mmol的母液：根据母液的浓度、体积和碳酸氢钠分子量计算出配制母液的碳酸氢钠重量，称取碳酸氢钠，将碳酸氢钠放入烧杯中，加入体积为配制母液体积二分之一的蒸馏水，使碳酸氢钠溶解，将溶解后的碳酸氢钠溶液倒入配制母液同样体积的容量瓶中，用蒸馏水洗涤3次，将洗涤后的蒸馏水也倒入容量瓶，最后用蒸馏水定容至容量瓶刻度处；(5)上述母液均放置4℃冰箱保存，备用；B、精子稀释液的配制：(1)用取样器从各组分母液中量取配制激活液，根据激活液配方中各组分的浓度、各组分母液的浓度、以及所配制的激活液体积，按如下公式计算：量取体积＝配方浓度×稀释液体积÷母液浓度；(2)将上述各组分混合均匀；配制的激活液体积大于100ml，在相应体积的容量瓶中混匀，然后用蒸馏水定容至容量瓶刻度，配制的稀释液体积小于100ml，在玻璃瓶中混匀，根据配制的稀释液体积减去已经量取的各组分体积总和，加入的蒸馏水体积；(3)配制好的稀释液放置4℃冰箱保存，备用。