[发明专利]一种罗非鱼精子通用激活液及制备方法

权利要求书

1.一种罗非鱼精子通用激活液，它由以下重量份的原料制成：

激活液渗透压为87.4～134.2mOsM，pH为8.0～9.0；

一种罗非鱼精子通用激活液的制备方法，其步骤是：

A、激活液母液的配制：

(1)每毫升含蔗糖1mmol的母液：根据母液的浓度、体积和蔗糖分子量计算出配制母液的蔗糖重量，称取蔗糖，将蔗糖放入烧杯中，加入体积为配制母液体积二分之一的蒸馏水，使蔗糖溶解，将溶解后的蔗糖溶液倒入配制母液同样体积的容量瓶中，用蒸馏水洗涤3次，将洗涤后的蒸馏水也倒入容量瓶，最后用蒸馏水定容至容量瓶刻度处，蔗糖重量计算公式如下：

溶质重量＝母液浓度×溶质分子量÷母液体积；

(2)每毫升含氯化钾1mmol的母液：根据母液的浓度、体积和氯化钾分子量计算出配制母液需要的氯化钾重量，称取氯化钾，将氯化钾放入烧杯中，加入配制母液体积二分之一的蒸馏水，使氯化钾充分溶解，将溶解后的氯化钾溶液倒入配制母液同样体积的容量瓶中，用蒸馏水洗涤3次，将洗涤后的蒸馏水也倒入容量瓶，最后用蒸馏水定容至容量瓶刻度处；

(3)每毫升含氯化镁0.5mmol的母液：根据母液的浓度、体积和氯化镁分子量计算出配制母液的氯化镁重量，称取氯化镁，将氯化镁放入烧杯中，加入体积为配制母液体积二分之一的蒸馏水，使氯化镁溶解，将溶解后的氯化镁溶液倒入配制母液同样体积的容量瓶中，用蒸馏水洗涤3次，将洗涤后的蒸馏水也倒入容量瓶，最后用蒸馏水定容至容量瓶刻度处；

(4)每毫升含碳酸氢钠0.5mmol的母液：根据母液的浓度、体积和碳酸氢钠分子量计算出配制母液的碳酸氢钠重量，称取碳酸氢钠，将碳酸氢钠放入烧杯中，加入体积为配制母液体积二分之一的蒸馏水，使碳酸氢钠溶解，将溶解后的碳酸氢钠溶液倒入配制母液同样体积的容量瓶中，用蒸馏水洗涤3次，将洗涤后的蒸馏水也倒入容量瓶，最后用蒸馏水定容至容量瓶刻度处；

(5)上述母液均放置4℃冰箱保存，备用；

B、精子稀释液的配制：

(1)用取样器从各组分母液中量取配制激活液，根据激活液配方中各组分的浓度、各组分母液的浓度、以及所配制的激活液体积，按如下公式计算：

量取体积＝配方浓度×稀释液体积÷母液浓度；

(2)将上述各组分混合均匀；配制的激活液体积大于100ml，在相应体积的容量瓶中混匀，然后用蒸馏水定容至容量瓶刻度，配制的稀释液体积小于100ml，在玻璃瓶中混匀，根据配制的稀释液体积减去已经量取的各组分体积总和，加入的蒸馏水体积；

(3)配制好的稀释液放置4℃冰箱保存，备用。

2.根据权利要求1所述的一种罗非鱼精子通用激活液，其特征在于：

激活液渗透压为93.6～128.4mOsM，pH为8.1～8.9。

3.根据权利要求1所述的一种罗非鱼精子通用激活液，其特征在于：

激活液渗透压为99.4～122.6mOsM，pH为8.2～8.8。

4.根据权利要求1所述的一种罗非鱼精子通用激活液，其特征在于：

激活液渗透压为105.2～116.8mOsM，pH为8.3～8.7。

5.根据权利要求1所述的一种罗非鱼精子通用激活液，其特征在于：

激活液渗透压为111.0mOsM，pH为8.5。

6.根据权利要求1所述的一种罗非鱼精子通用激活液，其特征在于：

激活液渗透压为121.0mOsM，pH为8.6。