[发明专利]小桐子高频再生方法

摘要

本发明涉及一种小桐子高频再生方法，包括：获得无菌苗步骤，选取饱满的野生小桐子种子，消毒处理后将种子胚和子叶接种在萌发培养基上萌发培养，获得无菌苗；愈伤组织初次诱导步骤，剪取无菌苗长势好的子叶切成小块，接入愈伤组织初次诱导培养基黑暗培养7~11天；愈伤组织再次诱导步骤，取出经过初次诱导的愈伤组织，转入愈伤组织再次诱导培养基黑暗培养12~14天；再生芽诱导步骤，取出经过再次诱导的愈伤组织转入不定芽诱导培养基光照培养直至获得分化出的不定芽；生根培养步骤，选取茎叶生长均匀的不定芽切下，并在吲哚丁酸或生根粉中浸泡后接入生根培养基进行生根培养；炼苗移栽步骤。本发明愈伤率可达100%，不定芽分化率可达90%左右。

主权项

一种小桐子高频再生方法，其特征在于，包括如下步骤：获得无菌苗步骤，选取饱满的野生小桐子种子，剥去外壳，消毒处理后再剥离胚乳，将完整的种子胚和子叶接种在萌发培养基上萌发培养，获得无菌苗；愈伤组织初次诱导步骤，剪取无菌苗长势好的子叶再切成子叶小块并接入愈伤组织初次诱导培养基黑暗培养7~11天，该愈伤组织初次诱导培养基成分为：MS培养基+0.5 ~8.0 mg/L吲哚丁酸，PH值5.8；愈伤组织再次诱导步骤，取出经过初次诱导的愈伤组织，转入愈伤组织再次诱导培养基黑暗培养12~14天，该愈伤组织再次诱导培养基成分为：MS培养基+0.1~2.0 mg/L 6‑苄基嘌呤+0.05 ~1.0 mg/L吲哚丁酸；再生芽诱导步骤，取出经过再次诱导的愈伤组织转入不定芽诱导培养基光照培养直至获得分化出的不定芽，该不定芽诱导培养基成分为：MS培养基+0.5~1.5 mg/L 6‑苄基嘌呤+0.05 ~0.1 mg/L吲哚丁酸+0~1.0 mg/L的赤霉素；生根培养步骤，选取茎叶生长均匀的不定芽切下，并在0.1~2.0 mg/L的吲哚丁酸或生根粉中浸泡5~120min，接入生根培养基进行生根培养，该生根培养基成分为：1/2MS培养基+0~2 mg/L吲哚丁酸；炼苗移栽步骤，选择长出至少3条长度超过3cm的根的生根苗，炼苗移栽。