[发明专利]一种高纯度多粘菌素B的制备方法

摘要

本发明公开了一种高纯度多粘菌素B的制备方法，步骤为：(1)上柱液的准备；(2)上高效液相色谱制备柱，硫酸钠-磷酸缓冲液/有机溶剂作为流动相，收集目标组分，重点去除杂质B1-1和B3，HPLC测定收集液，目标成分B1或B2或B1和B2的混合物的色谱纯度在99.5％以上；(3)精制：将收集的目标组分真空浓缩去有机溶剂，余相进行纳滤脱盐浓缩，浓缩液，得到纯度在99.5％以上的多粘菌素B。本发明的方法提纯多粘菌素B具有纯度高、收率高、工艺简单、可连续进样等优点，产品质量远高于目前EP、USP规定的药用标准，设备一次性投资稍高，但运行成本不高，适合于工业化生产。

主权项

一种高纯度多粘菌素B的制备方法，其特征是包括如下步骤：(1)上柱液的准备：按1g∶20‑100ml的比例将经发酵并经分离提取得到的原料硫酸多粘菌素B溶于水中，经微孔过滤除杂，得澄清溶液；(2)上柱分离：流动相为体积比为15‑25∶85‑75的有机溶剂和硫酸钠‑磷酸缓冲液，所述硫酸钠‑磷酸缓冲液为用磷酸调pH＝2.0‑3.0的20‑40mM的硫酸钠水溶液；将步骤(1)获得的澄清溶液进样上高效液相色谱制备柱，制备柱工作压力为3.0‑10.0MPa，工作温度为15‑35℃，检测波长为215nm，收集不同时段组分，所述目标组分为多粘菌素B1单体、多粘菌素B2单体，或多粘菌素B1和B2的混合物；(3)精制：将收集的目标组分真空蒸馏，去除有机溶剂，余相进行纳滤脱盐浓缩，浓缩液经喷干或冻干，得到色谱纯度在99.5％以上、单一杂质在0.1％以下的多粘菌素B1单体、多粘菌素B2单体，或多粘菌素B1和B2的混合物。