[发明专利]一种维持鱼类肠细胞增殖分化的原代培养方法无效
| 申请号： | 201110348822.5 | 申请日： | 2011-11-08 |
| 公开（公告）号： | CN102382795A | 公开（公告）日： | 2012-03-21 |
| 发明（设计）人： | 周小秋;姜俊;冯琳;刘扬;胡凯;姜维丹 | 申请（专利权）人： | 四川农业大学 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 611130 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本发明公开了维持鱼类肠细胞增殖分化的原代培养方法，包括以下步骤：1)、按常规方法将鱼体表消毒，无菌取出整个内脏，去除肠道表面的系膜组织，洗净肠道内容物；2)、将肠道剪切成2～3mm的组织小块；3)、用混合液消化分离肠细胞，得到鱼肠细胞和细胞团；4)、用离心方法分离纯化得到鱼肠细胞团；5)、将分离纯化的鱼肠细胞团计数接种于胶原蛋白涂抹的培养板中进行培养；6)、接种的鱼肠细胞团在24～26℃条件下原代培养，细胞贴壁生长，增殖分化。本发明根据鱼类肠道组织结构特点，摸索了最佳的鱼肠细胞分离酶的种类、使用浓度和肠细胞团的纯化方法。采用商品胶原蛋白涂抹方便涂抹细胞培养器皿，摸索了最佳的鱼肠细胞接种和密闭培养条件。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 维持 鱼类 细胞 增殖 分化 培养 方法 | ||
【主权项】：
一种维持鱼类肠细胞增殖分化的原代培养方法，其特征在于，包括以下步骤：1)、按常规方法将鱼体表消毒，无菌取出整个内脏，去除肠道表面的系膜组织，洗净肠道内容物；2)、将肠道剪切成2～3mm的组织小块；3)、用混合液消化分离肠细胞，得到鱼肠细胞和细胞团；4)、用离心方法分离纯化得到鱼肠细胞团；5)、将分离纯化的鱼肠细胞团计数接种于胶原蛋白涂抹的培养板中进行培养；6)、接种的鱼肠细胞团在24～26℃条件下原代培养，细胞贴壁生长，增殖分化。
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