[发明专利]单核细胞增生李斯特氏菌的链置换恒温扩增(SDA)快速检测试剂盒及其检测方法

摘要

本发明涉及一种用依赖于链置换扩增技术的单核细胞增生李斯特氏菌恒温扩增快速检测试剂盒及其检测方法。该试剂盒内有模板预处理反应液、链置换扩增反应液Ⅰ、Bst??DNA??Polymerase，BsoBI。检测单核细胞增生李斯特氏菌的方法包括细菌DNA的提取、模板预处理、SDA链置换恒温扩增、核酸检测。其优点是快速、特异性强、灵敏度高而且成本低。

主权项

一种单核细胞增生李斯特氏菌的恒温扩增快速检测试剂盒，其特征在于包括：(1)模板预处理反应液：1×NEB buffer 2，1.0μM上游内引物S1、1.0μM下游内引物S2、3％(V/V)二甲基亚砜、和ddH2O；所述1×NEB buffer 2为：50mM NaCl、10mM Tris HCl、10mM MgCl2、1mM二硫苏糖醇、和ddH2O，pH 7.9；所述引物S1、引物S2分别如SEQ ID NO：1和2所示；(2)链置换扩增反应液I：3％(V/V)二甲基亚砜，0.1mg/mL牛血清白蛋白，浓度分别为0.2mM的dATP、dGTP和dTTP，1.0mM dCTPαS，1×NEB buffer 2，和ddH2O；(3)Bst DNA聚合酶；(4)限制性内切酶BsoBI。