[发明专利]重组干细胞因子与免疫球融合蛋白及其制备

摘要

本发明公开了一种重组干细胞因子与免疫球融合蛋白，其特征在于：该融合蛋白，由两部分组成：干细胞因子部分和免疫球蛋白Fc段；免疫球蛋白Fc段组成为免疫球蛋白G，E，D，M和A型的Fc段，及部分Fc段或者Fc段与Fab的融合体。其制备步骤为：1)宿主细胞的选择；2)构建重组表达载体；3)宿主细胞的转染；4)宿主细胞的筛选；5)细胞培养过程；6)目标蛋白质的分离与纯化。该制备步骤分离变的方便快捷高效，产品稳定性更好，蛋白在体内半衰期显著长，效果好。

主权项

一种重组干细胞因子与免疫球融合蛋白，其特征在于：该融合蛋白，由两部分组成：干细胞因子部分和免疫球蛋白Fc段；免疫球蛋白Fc段组成为免疫球蛋白G，E，D，M和A型的Fc段，及部分Fc段或者Fc段与Fab的融合体；重组干细胞因子与免疫球蛋白Fc段融合蛋白核苷酸序列为：Atgaagaagacacaaacttggattatcacttgcatttatcttcaactgctcctatttaatcctcttgtcaaaaccaaggagatctgcgggaatcctgtgactgataatgtaaaagacattacaaaactggtggcaaatcttccaaatgactatatgataaccctcaactatgtcgccgggatggatgttttgcctagtcattgttggctacgagatatggtaatacaattatcactcagcttgactactcttctggacaagttctcaaatatttctgaaggcttgagtaattactccatcatagacaaacttgggaaaatagtggatgacctcgtgttatgcatggaagaaaacgcaccgaagaatataaaagaatctccgaagaggccagaaactagatcctttactcctgaagaattctttagtattttcaatcaattcaccatggcagagcccaaatcttctgacaaaactcacacatgcccaccgtgcccagcacctgaactcgcggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgcccccatcccgggatgagctgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgctggactccgacggctccttcttcctctacagcaagctcaccgtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaaggatccgccgccatcatggactacaaggacgacgacgacaagtag下划线部分为干细胞因子部分相应的氨基酸序列为： Met Lys Lys Thr Gln Thr Trp Ile Ile Thr Cys Ile Tyr Leu Gln Leu Leu Leu Phe Asn  1   2   3   4   5   6   7   8   9  10  11  12  13  14  15  16  17  18  19  20Pro Leu Val Lys Thr Lys Glu Ile Cys Gly Asn Pro Val Thr Asp Asn Val Lys Asp Ile 21  22  23  24  25  26  27  28  29  30  31  32  33  34  35  36  37  38  39  40Thr Lys Leu Val Ala Asn Leu Pro Asn Asp Tyr Met Ile Thr Leu Asn Tyr Val Ala Gly 41  42  43  44  45  46  47  48  49  50  51  52  53  54  55  56  57  58  59  60Met Asp Val Leu Pro Ser His Cys Trp Leu Arg Asp Met Val Ile Gln Leu Ser Leu Ser 61  62  63  64  65  66  67  68  69  70  71  72  73  74  75  76  77  78  79  80Leu Thr Thr Leu Leu Asp Lys Phe Ser Asn Ile Ser Glu Gly Leu Ser Asn Tyr Ser Ile 81  82  83  84  85  86  87  88  89  90  91  92  93  94  95  96  97  98  99 100Ile Asp Lys Leu Gly Lys Ile Val Asp Asp Leu Val Leu Cys Met Glu Glu Asn Ala Pro101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120Lys Asn Ile Lys Glu Ser Pro Lys Arg Pro Glu Thr Arg Ser Phe Thr Pro Glu Glu Phe121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140Phe Ser Ile Phe Asn Gln Phe Thr Met Ala Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp181 182 183 184 185 186 187 188 189 190 191 192 193 194 195 196 197 198 199 200Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His201 202 203 204 205 206 207 208 209 210 211 212 213 214 215 216 217 218 219 220Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val221 222 223 224 225 226 227 228 229 230 231 232 233 234 235 236 237 238 239 240Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn241 242 243 244 245 246 247 248 249 250 251 252 253 254 255 256 257 258 259 260Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu261 262 263 264 265 266 267 268 269 270 271 272 273 274 275 276 277 278 279 280Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu281 282 283 284 285 286 287 288 289 290 291 292 293 294 295 296 297 298 299 300Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly301 302 303 304 305 306 307 308 309 310 311 312 313 314 315 316 317 318 319 320Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe321 322 323 324 325 326 327 328 329 330 331 332 333 334 335 336 337 338 339 340Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys341 342 343 344 345 346 347 348 349 350 351 352 353 354 355 356 357 358 359 360Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro361 362 363 364 365 366 367 368 369 370 371 372 373 374 375 376 377 378 379 380Gly Lys Gly Ser Ala Ala Ile Met Asp Tyr Lys Asp Asp Asp Asp Lys ***381 382 383 384 385 386 387 388 389 390 391 392 393 394 395 396 397。