[发明专利]一种改进的生产β-甘露聚糖酶的方法无效
申请号: | 201110206380.0 | 申请日: | 2011-07-22 |
公开(公告)号: | CN102888415A | 公开(公告)日: | 2013-01-23 |
发明(设计)人: | 项文胜;王俊峰;李尚坤 | 申请(专利权)人: | 江苏奕农生物工程有限公司 |
主分类号: | C12N15/56 | 分类号: | C12N15/56;C12N15/81;C12N1/19;C12N9/42;C12P19/14;C12R1/84 |
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摘要: | 本发明涉及一种β-甘露聚糖酶的高产方法,本方法是通过将一个编码为内切β-甘露聚糖酶的多核苷酸被化学合成、克隆以及与a-因子信号肽结合后在胞外表达(受到乙醇氧化酶基因AOX1启动子的控制)等过程。在一个500L的生物反应器中,所选的高表达工程菌株能分泌大约4g/L蛋白至培养液中,高表达菌株能产生约4305U/mL的β-甘露聚糖酶酶活。Co2+和Mn2+能显著增强甘露聚糖的水解活性。产生的β-甘露聚糖酶能高效水解甘露聚糖、葡甘露聚糖和半乳甘露聚糖。 | ||
搜索关键词: | 一种 改进 生产 甘露 聚糖 方法 | ||
【主权项】:
一种生产β‑甘露聚糖酶的方法,包括以下步骤:(1)一种合成的β‑甘露聚糖酶基因与DNA载体中的启动子结合,产生一个表达框,(2)将DNA载体接种到一个酵母细胞中,(3)小规模培养条件下,通过测定β‑甘露聚糖酶活性筛选出高表达菌株,(4)在500L的生物反应器中,筛选高表达β‑甘露聚糖酶的菌株
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