[发明专利]用于识别具有结合配体能力的异源多聚体修饰的泛素蛋白质的方法有效
申请号: | 201080056911.6 | 申请日: | 2010-12-14 |
公开(公告)号: | CN102753568A | 公开(公告)日: | 2012-10-24 |
发明(设计)人: | 安雅·库纳特;约尔格·纳坎普;阿诺德·施托伊尔纳格尔;马库斯·菲德莱尔;埃里克·菲德莱尔;托马斯·戈特勒 | 申请(专利权)人: | 塞尔蛋白质股份有限公司 |
主分类号: | C07K14/00 | 分类号: | C07K14/00;C12N15/10;C40B40/02 |
代理公司: | 北京康信知识产权代理有限责任公司 11240 | 代理人: | 李丙林;张英 |
地址: | 德国*** | 国省代码: | 德国;DE |
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摘要: | 本发明涉及用于识别具有结合配体能力的异源多聚体泛素的方法。此外,本发明提供编码所述异源多聚体泛素群的DNA库和由所述DNA库的表达获得的蛋白质库、包含所述DNA或蛋白质的细胞和噬菌体、编码所述融合蛋白(fusion proteins)的多聚核苷酸和包括所述多聚核苷酸的载体。进一步提供能够以高亲和力特异性地结合到所选择的配体上的基于异源多聚体泛素的新的结合蛋白质。 | ||
搜索关键词: | 用于 识别 具有 结合 体能 异源多聚体 修饰 蛋白质 方法 | ||
【主权项】:
一种用于识别具有结合配体能力的异源多聚体修饰的泛素的方法,包括下列步骤:a)提供来源于单体修饰的泛素蛋白质的异源多聚体修饰的泛素的群,所述群包括异源多聚体蛋白质,所述异源多聚体蛋白质包括两个或更多以首尾排列的方式连接在一起的泛素单体,其中所述异源多聚体蛋白质的至少一个所述单体是至少通过定位在SEQ ID NO:1的位置2、4、6、8、62、63、64、65、66和68处的至少三个氨基酸中的表面暴露的氨基酸的取代而不同地修饰的,所述修饰的单体蛋白质与未修饰的泛素蛋白质具有至少80%或至少90%或至少95%的氨基酸序列同一性;b)为所述不同地修饰的泛素蛋白质的群提供潜在的配体;c)使所述不同地修饰的蛋白质的群与所述配体接触;d)通过筛选方法识别异源多聚体修饰的蛋白质,其中所述修饰的异源多聚体蛋白质以Kd范围是10‑7‑10‑12M的特定的结合亲和力结合于所述配体并且对于所述配体表现单价的结合活性;和可选地e)利用所述结合亲和力分离所述异源多聚体修饰的泛素。
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