[发明专利]一种整合牛NRAMP1巨噬细胞特异性表达载体/牛成纤维细胞及其方法无效
申请号: | 201010603533.0 | 申请日: | 2010-12-17 |
公开(公告)号: | CN102559749A | 公开(公告)日: | 2012-07-11 |
发明(设计)人: | 王华岩;程祥;邓捷;马晓玲;孟书燕;来威锋 | 申请(专利权)人: | 西北农林科技大学 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;C12N5/10;C12N15/06 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 712100 *** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | 一种整合牛NRAMP1巨噬细胞特异性表达载体/牛成纤维细胞及其方法,构建了一种包含NRAMP1巨噬细胞特异性表达载体pSP-NRAMP1-HA,以及一种基于该载体的包含NRAMP1基因的秦川牛成纤维细胞系,利用该细胞系作为核供体细胞的方法,为解决秦川牛布氏杆菌病的转基因牛提供坚实的基础。本发明通过脂质体转染法将外源性表达载体pSP-NRAMP1-HA导入牛成纤维细胞,经G418筛选获得阳性细胞,经PCR鉴定,证实目的基因NRAMP1整合到牛成纤维细胞的基因组中;最后将整合有NRAMP1基因的牛成纤维细胞作为核供体移入牛去核卵母细胞,获得转基因克隆胚。 | ||
搜索关键词: | 一种 整合 nramp1 巨噬细胞 特异性 表达 载体 纤维 细胞 及其 方法 | ||
【主权项】:
一种整合牛NRAMP1巨噬细胞特异性表达载体,其特征在于:其包含巨噬细胞特异性启动子SP以及HA标签的目的基因NRAMP1。
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