[发明专利]一种治疗心脑血管疾病的药物组合物的检测方法

摘要

本发明公开了一种疗心脑血管疾病的药物组合物的检测方法，属于中药技术领域。本发明药物组合物的原料药组成为：丹参、川芎、葛根等。本发明针对中药疗效不稳定的问题提供上述原料制成的中药组合物的检测方法，是通过大量具体创造性试验筛选后得到，鉴别方法中通过对样品处理方法的筛选，展开剂的选择，使得鉴别专属性很好，而且方法经济适用、结果快速，并且对不同的薄层板都能应用。含量测定方法中通过对样品处理方法的筛选，展开剂的选择，使得含量测定方法可以很有效的对产品进行质量控制，并且用该方法控制质量的产品相比其他方法在药效上表现的更为稳定。

主权项

一种治疗治疗心脑血管疾病的中药组合物检测方法，其特征在于该方法包括如下鉴别方法和/或含量测定方法中的一种或几种：所述中药组合物的原料药组成为：丹参300‑500重量份、川芎150‑300重量份、葛根150‑300重量份、何首乌200‑400重量份、山楂200‑400重量份。鉴别方法为：A.葛根的定性鉴别 取0.5‑2倍每次服用剂量的本品制剂或内容物，加乙酸乙酯10‑30ml，超声处理10‑30分钟，滤过，挥干，残渣加甲醇0.5‑2ml溶解，作为供试品溶液；另取葛根素对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各5‑20μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以15‑40∶5‑20∶0.5‑2比例的三氯甲烷‑甲醇‑水为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；B.丹参的定性鉴别 取0.5‑2倍每次服用剂量的本品制剂或内容物，加30‑70mL50‑80％乙醇溶液超声提取10‑40min，滤过，滤液蒸至近干，加水10‑30mL充分溶解，用稀HCl调PH值至1～2，用乙醚提取2‑4次，每次10‑30mL，合并乙醚液，用无水硫酸钠脱水，滤过，蒸干乙醚，残渣加0.5‑2ml乙醇使溶解，作为供试品溶液；另取原儿茶醛对照品，加乙醇溶解，制成1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述对照品溶液3‑7ul，样品溶液10‑20uL，分别点于同一硅胶G板上，以10‑30∶2‑6∶0.5‑2比例的氯仿‑丙酮‑甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3％三氯化铁乙醇溶液，用风筒吹至斑点清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点；C.川芎的定性鉴别 取0.5‑2倍每次服用剂量的本品制剂或内容物，加50‑80％乙醇30‑70mL，超声提取20‑40min，滤过，滤液蒸至近干，加水10‑30mL充分溶解，用乙酸乙酯提取1‑4次，每次10‑30mL，合并乙酸乙酯层，用无水硫酸钠脱水，滤过，滤液蒸干，残留物加乙酸乙酯1mL溶解，作为供试品溶液；另取川芎对照药材0.5g，加乙酸乙酯10‑30mL，超声提取10‑30min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯5mL使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取对照药材溶液3～5uL供试品溶液10uL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以5‑15∶0.5‑2比例的正己烷‑乙酸乙酯为展开剂，预饱和10‑20min，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材相应的位置上，显相同的荧光斑点；D.丹参的定性鉴别 取0.5‑2倍每次服用剂量的本品制剂或内容物，加乙醚10‑30ml，超声处理10‑30分钟，滤过，挥干，残渣加醋酸乙酯2ml溶解，作为样品液；另取丹参酮IIA对照品，加入醋酸乙酯制成每1ml含2mg的对照品液；再取丹参对照药材0.5‑2g，置于具塞试管中，加入乙醚5ml振摇，放置1h，过滤，滤液挥干，残渣加入醋酸乙酯1ml溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，取上述4种溶液各5‑15uL，点于同一硅胶G薄层板上，以10‑30∶0.5‑2比例的苯‑醋酸乙酯为展开剂，展开，晾干，置于日光下检视，供试品、丹参酮II A对照品、丹参对照药材在相应位置上显相同颜色斑点；含量测定方法：A.丹参含量测定照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定。色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以4‑12∶80‑100比例的甲醇‑1％醋酸溶液为流动相；检测波长为280nm；理论板数按丹参素峰计算应不低于2000；对照品溶液的制备 取丹参素钠对照品适量，精密称定，加30‑70％甲醇制成每1ml含20‑80μg的溶液(相当于每1ml含丹参素18‑72μg)，即得；供试品溶液的制备 取本药物组合物制剂或内容物适量，研成细粉，取约0.3‑0.8g，精密称定，置50ml锥形瓶中，精密加入30‑70％甲醇25ml，称定重量，超声处理(功率200W，频率40kHZ)3‑10分钟，放冷，再称定重量，用30‑70％甲醇补充减失的重量，摇匀，微孔滤膜(0.45μm)过滤，取续滤液，即得；测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液5‑15μl，注入液相色谱仪，测定，丹参含量以丹参素纳含量计每次服用量不得少于10.0mg，即得；B.葛根含量测定照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定。色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填料；以15‑35∶65‑85比例的甲醇‑水为流动相；检测波长为250nm，理论板数按葛根素峰计算应不低于2000；对照品溶液的制备 精密称取葛根素对照品适量，加20‑50％乙醇制成每1ml含10.0‑20.0ug的溶液，即得；供试品溶液的制备 取本药物组合物制剂或内容物适量，研细，精密称取0.3‑0.8g，置具塞锥形瓶中，精密加20‑50％乙醇30‑70ml，称定重量，加热回流20‑40min，放冷，再称定重量，用20‑50％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液10μl，注入液相色谱仪，测定，葛根含量以葛根素计每次服用量不得少于1.6mg，即得；C.川芎含量测定照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定。色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填料；以20‑50∶50‑70∶0.5‑2比例的甲醇‑水‑冰醋酸为流动相；检测波长为323nm，理论板数按阿魏酸峰计算应不低于2000，柱温25℃；对照品溶液的制备 精密称取阿魏酸对照品适量，加甲醇制成每1ml含20.0‑40.0ug的溶液，即得；供试品溶液的制备 取本药物组合物制剂或内容物适量，研细，精密称取5.0‑10.0g，溶于10‑30ml蒸馏水中，置于分液漏斗中，用乙醚萃取3次，每次10‑20ml，合并乙醚液于50℃水浴中挥干，残渣置于25ml棕色量瓶中，加入甲醇溶解和定容，过滤，得供试品溶液；测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液10μl，注入液相色谱仪，测定，川芎含量以阿魏酸计每次服用量不得少于1.2mg，即得。