[发明专利]制备基因工程菌株的方法及生产藤黄绿菌素的方法无效
| 申请号： | 201010282431.3 | 申请日： | 2010-09-15 |
| 公开（公告）号： | CN101948790A | 公开（公告）日： | 2011-01-19 |
| 发明（设计）人： | 许煜泉;黄显清 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12N15/03;C12P17/10;C12R1/38 |
| 代理公司： | 上海交达专利事务所 31201 | 代理人： | 王锡麟;王桂忠 |
| 地址： | 200240 *** | 国省代码： | 上海;31 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 一种基因工程技术领域的制备基因工程菌株的方法及生产藤黄绿菌素的方法；制备所述菌株的方法包括如下步骤：从假单胞菌(Pseudomona sp.)M18的总基因组DNA中克隆pqsR基因；将pqsR基因亚克隆至携带抗生素抗性基因的质粒，得重组质粒；在pqsR基因中插入抗生素抗性基因，构建重组自杀质粒；将重组自杀质粒转化至大肠杆菌，之后与假单胞菌(Pseudomonas sp.)M18野生型菌株双亲杂交，抗性筛选，即得基因工程菌株；利用前述基因工程菌株生产藤黄绿菌素的方法，包括如下步骤：培养基因工程菌株，得发酵液；提纯发酵液，得藤黄绿菌素。利用本发明制备的基因工程菌株使得藤黄绿菌素的发酵效价约为150毫克，与现有技术相比发酵效价提高了3～4倍。 | ||
| 搜索关键词： | 制备 基因工程 菌株 方法 生产 藤黄 菌素 | ||
【主权项】：
一种基因工程菌株的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一，从假单胞菌M18的总基因组DNA中克隆pqsR基因；步骤二，将pqsR基因亚克隆至携带抗生素抗性基因的质粒，得重组质粒；步骤三，在pqsR基因中插入抗生素抗性基因，构建重组自杀质粒；步骤四，将重组自杀质粒转化至大肠杆菌，之后与假单胞菌M18野生型菌株双亲杂交；步骤五，利用含有步骤三所述抗生素的培养基和含有步骤二所述抗生素的培养基进行筛选，得到能在含步骤三所述抗生素的培养基上生长，且在含步骤二所述抗生素的培养基上不能生长的菌株，即得基因工程菌株。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于上海交通大学，未经上海交通大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201010282431.3/，转载请声明来源钻瓜专利网。
