[发明专利]一种烷基型硫酸酯酶及其制备方法有效

专利信息
申请号: 201010274512.9 申请日: 2010-09-07
公开(公告)号: CN101942427A 公开(公告)日: 2011-01-12
发明(设计)人: 阮灵伟;徐洵;龙梦娴 申请(专利权)人: 国家海洋局第三海洋研究所
主分类号: C12N9/16 分类号: C12N9/16;C12N15/55;C12N15/70
代理公司: 厦门南强之路专利事务所 35200 代理人: 马应森
地址: 361005 福*** 国省代码: 福建;35
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摘要: 一种烷基型硫酸酯酶及其制备方法,涉及硫酸酯酶。提供一种烷基型硫酸酯酶SdsA及制备方法,以及烷基型硫酸酯酶基因sdsA。烷基型硫酸酯酶SdsA的生产菌株为假单胞菌株Pseudomonas sp.S9。制备时,克隆烷基型硫酸酯酶基因sdsA,将烷基型硫酸酯酶基因sdsA插入表达载体,构建携带烷基型硫酸酯酶基因sdsA的重组表达载体;将烷基型硫酸酯酶基因sdsA的重组表达载体转化到大肠杆菌BL21中,选取阳性克隆于培养基中培养;离心收集发酵后的大肠杆菌BL21细胞,重悬大肠杆菌BL21细胞于裂解缓冲液中,将裂解后的悬液离心,收集上清液,再与Ni-NTA Agarose混匀,纯化。
搜索关键词: 一种 烷基 硫酸酯酶 及其 制备 方法
【主权项】:
一种烷基型硫酸酯酶SdsA,其特征在于所述烷基型硫酸酯酶SdsA的生产菌株为假单胞菌株Pseudomonas sp.S9,该菌株已于2010年7月20日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏中心登记入册编号为CGMCC No.4026;所述烷基型硫酸酯酶SdsA的氨基酸序列如下:1   MKLNALSTAT HGSRSSPVKL WKFSTSFLLA ASIIVSGQSW AAETAKPATD ATKAANDALL61  KELPFDDKTS FDLAHKGFIA PLPAEPIKGE KGNMIWDPSK YGFIKEGEAA PDTTNPSLWR121 QSQLINISGL FEVTDGIYQV RNYDLSNMTI VEGKDGITIF DPLISQETAK AALDLYYKHR181 PKKPVVAVIY THSHVDHYGG VRGVVDEADV KAGKVKIYAP LGFLEHAVAE NVMAGTAMSR241 RASYMYGNLL PPDAKGQLGA GLGTTTSAGT VTLIPPTDII KETGETHVID GLTYEFMYAP301 GSEAPAEMLY YIKEKKALNA AEDSTHTLHN TYSLRGAKIR DPLAWSKYLN EALKLWGDDV361 QVMYAMHHWP VWGNKEVREQ LSLQRDMYRY INDETLRLAN KGYTMTEIAE QVKLPKKIAT421 KFSNRGYYGS LNHNVKATYV LYLGWFIGNP ATLWELPPAD KAKRYVEMMG GADAVLKKAK481 EYYDKGDFRW VAEVVNHVVF AEPNNQAAKN MQADALEQLG YQAESGPWRN FYLTGAQELR541 NGVQQLPTPD TASPDTVKAM DLDLFFDFLA MRLKGPDVAD KHITLNLDFT DLKQKYTLEM601 VNGVLNHTEG MQAKNADATV TLTRETLNNV MLKQTTLKDA ESSGDIKIEG DKGKLEELMS661 YMDNFDFWFN IVTP
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