[发明专利]小鼠精原干细胞的体外分离培养方法及其专用培养基无效
| 申请号： | 201010269931.3 | 申请日： | 2010-08-31 |
| 公开（公告）号： | CN102382799A | 公开（公告）日： | 2012-03-21 |
| 发明（设计）人： | 吴际 | 申请（专利权）人： | 吴际 |
| 主分类号： | C12N5/076 | 分类号： | C12N5/076 |
| 代理公司： | 上海天翔知识产权代理有限公司 31224 | 代理人： | 吕伴 |
| 地址： | 200240 上海市*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明提供小鼠精原干细胞的体外分离培养方法，包括如下步骤：步骤一，收集小鼠睾丸，采用两步酶消化法制备细胞悬液；步骤二，利用免疫磁珠分选法分离出精原干细胞；步骤三，制备精原干细胞的培养液，对精原干细胞进行原代培养和传代培养。本发明还提供所述方法使用的培养基，由STO细胞饲养层和精原干细胞培养液组成，所述精原干细胞培养液包括基础培养基、FBS、氨基酸、LIF、bFGF、IGF-1R激活剂、维生素C、EGF、GDNF。利用本发明的方法和培养基，可使来源于幼体或成体小鼠的精原干细胞均能够在体外长期培养并增殖，能够建立长期维持稳定生长的精原干细胞系，并且维持其精子发生的功能。本发明的方法操作简便，安全可靠，成本低廉。 | ||
| 搜索关键词： | 小鼠 干细胞 体外 分离 培养 方法 及其 专用 培养基 | ||
【主权项】：
小鼠精原干细胞的体外分离培养方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一，收集小鼠睾丸，采用两步酶消化法制备细胞悬液；步骤二，利用免疫磁珠分选法分离出精原干细胞；步骤三，制备精原干细胞培养液，对精原干细胞进行原代培养和传代培养。
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