[发明专利]一种精子细胞膜完整性及活力检测方法无效
| 申请号： | 201010249766.5 | 申请日： | 2010-08-10 |
| 公开（公告）号： | CN101906460A | 公开（公告）日： | 2010-12-08 |
| 发明（设计）人： | 邱毅;王磊光 | 申请（专利权）人： | 山东省计划生育科学技术研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/02 | 分类号： | C12Q1/02;G01N1/30 |
| 代理公司： | 山东济南齐鲁科技专利事务所有限公司 37108 | 代理人： | 陈月华 |
| 地址： | 250002 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种精子细胞膜完整性及活力检测方法，其步聚如下：①制备低渗液；②制备伊红-吉姆萨染液；③将精液加入步骤①中所述的低渗液中，混匀；④将盛有步骤③中所述的低渗液和精液的混合溶液的容器水浴30分钟；⑤向步骤④所述的混合溶液中加入0.1ml步骤②中所述的伊红-吉姆萨染液，混匀制成精液-HOS-EG混合液；⑥静置2分钟后取50μl步骤⑤中所述的精液-HOS-EG混合液置于清洁载玻片上，加盖22mm×22mm盖玻片，湿片封片，在显微镜下观察每条精子头部着色和尾部肿胀情况。它可解决现上述技术存在的问题，既可确定一个精子的尾部是否完整，又可清楚地鉴别其头部膜是否被破坏。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 精子 细胞膜 完整性 活力 检测 方法 | ||
【主权项】：
一种精子细胞膜完整性及活力检测方法，其特征在于：其步聚如下：①制备低渗液低渗液为每100ml蒸馏水中含0.735g柠檬酸钠和1.35g果糖，渗透压是150mOsm的溶液；②制备伊红 吉姆萨染液向每100ml的0.9%的生理盐水中加入0.5g伊红和0.1g吉姆萨混匀，使其充分溶解，配置成染液，再用双层滤纸将所述染液过滤，所得滤液即伊红 吉姆萨染液，伊红 吉姆萨染液置于22℃室温内保存备用；③将0.1ml精液加入1ml步骤①中所述的低渗液中，混匀；④将盛有步骤③中所述的低渗液和精液的混合溶液的容器置于水温37℃的水中水浴30分钟；⑤向步骤④所述的混合溶液中加入0.1ml步骤②中所述的伊红 吉姆萨染液，混匀制成精液 HOS EG混合液；⑥静置2分钟后取50μl步骤⑤中所述的精液 HOS EG混合液置于清洁载玻片上，加盖22mm×22mm盖玻片，湿片封片，在显微镜下观察每条精子头部着色和尾部肿胀情况，随机计数200条精子，计算4种类型精子的百分率。
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