[发明专利]藏羚羊成纤维细胞与受体卵母细胞的化学辅助融合方法无效

专利信息
申请号: 201010201827.0 申请日: 2010-06-12
公开(公告)号: CN101906412A 公开(公告)日: 2010-12-08
发明(设计)人: 于鸿浩;赵新全;郭志林;郭松长;曹俊虎;徐世晓 申请(专利权)人: 中国科学院西北高原生物研究所
主分类号: C12N15/06 分类号: C12N15/06
代理公司: 兰州中科华西专利代理有限公司 62002 代理人: 李艳华
地址: 810001 *** 国省代码: 青海;63
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摘要: 发明涉及一种藏羚羊成纤维细胞与受体卵母细胞的化学辅助融合方法,该方法包括以下步骤:(1)供体细胞和受体细胞的选择:供体细胞选择藏羚羊成纤维细胞,并将其培养在24孔板中;受体卵母细胞选择山羊、牦牛、黄牛或奶牛卵母细胞中的任意一种;(2)制作体积为25μL的融合微滴;(3)供体细胞与受体卵母细胞的融合:依次将受体卵母细胞移至T20、植物血凝素、T2B、融合液微滴内进行操作,形成两个卵母细胞夹杂一个供体细胞的复合体;将复合体移至融合液内平衡,再至融合槽内进行电融合即可。本发明有效地提高了细胞融合效率、降低了操作难度、缩减了操作时间,从而优化了手导式克隆技术细胞融合的技术环节。
搜索关键词: 羚羊 纤维 细胞 受体 化学 辅助 融合 方法
【主权项】:
一种藏羚羊成纤维细胞与受体卵母细胞的化学辅助融合方法,包括以下步骤:(1)供体细胞和受体细胞的选择:供体细胞选择藏羚羊成纤维细胞,并将其培养在24孔板中;受体卵母细胞选择山羊、牦牛、黄牛或奶牛卵母细胞中的任意一种;(2)制作体积为25μL的融合微滴;(3)供体细胞与受体卵母细胞的融合:依次将受体卵母细胞移至T20、植物血凝素、T2B、融合液微滴内进行操作,形成两个卵母细胞夹杂一个供体细胞的复合体;将复合体移至融合液内平衡2~3min后,再至融合槽内进行电融合即可。
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