[发明专利]结合物的制备方法及相关试剂盒

摘要

本发明提供制备结合物如酶标记物、尤其是碱性磷酸酶标记物的方法以及试剂盒。所述方法采用羧基化合物封闭含有氨基和羧基的待结合物A(如酶)分子表面的氨基基团，封闭了氨基的待结合物A(如酶)经碳二亚胺活化，之后将碳二亚胺失活或去除，加入含有氨基的待结合物B(如待标记物)，反应一段时间后，得到结合物(如酶标记物)。

主权项

1.由待结合物A和待结合物B制备结合物的方法，其中待结合物A含有氨基和羧基，待结合物B含有氨基，所述方法包括以下步骤：1)在交联剂存在下，用通式I的羧基化合物将待结合物A的氨基封闭：通式I中R₁为H、C_1-6烷基、C_nH_2nCOOH、苯基或苯基C_1-6烷基，其中n为0-4的整数，苯基或苯基C_1-6烷基由选自以下的取代基任选取代：卤素、羟基、巯基、氰基、硝基、烷基、芳基、烷氧基、杂环基、卤代烷基和羧基；R₂为H、Na、K等在水中发生解离的基团，所述交联剂为碳二亚胺和任选的羟基琥珀酰亚胺；2)纯化氨基封闭后的待结合物A；3)用交联剂活化氨基封闭的待结合物A的羧基，其中所述交联剂为碳二亚胺和任选的羟基琥珀酰亚胺；以及4)使活化后的待结合物A与待结合物B交联。