[发明专利]一种肝原代细胞的分离和培养方法有效
申请号: | 201010169838.5 | 申请日: | 2010-05-12 |
公开(公告)号: | CN102041242A | 公开(公告)日: | 2011-05-04 |
发明(设计)人: | 刘鸿君;沈国林 | 申请(专利权)人: | 北京汇智泰康医药技术有限公司 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 100176 北京市经济技术*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 一种肝原代细胞的分离和培养方法,它涉及生物技术领域。解决国内制备肝原代细胞领域的空白,肝细胞的培养采用“三明治胶”夹层法,能够使其保持较长时间的活力,解决了肝细胞没有像细胞系那样的增殖性而活性无法保持的问题。 | ||
搜索关键词: | 一种 肝原代 细胞 分离 培养 方法 | ||
【主权项】:
一种肝原代细胞的分离和培养方法,其特征在于(a):将切除的不完整肝脏组织块通过粘性溶剂封闭多余的血管管路,只保留一个可供灌流的进液血管口和一个出液血管口;(b):插入合适大小的针头,用粘性溶剂封住,等粘性溶剂干之后再涂一层粘性溶剂以防漏液;(c):放入36~42℃水浴锅内漂浮的容器中,开始灌输36~42℃的无钙灌流液,控制灌流速度和灌流时间;(d):清空无钙灌流液,灌输36~42℃的0.03~0.10%胶原酶灌流液,控制灌流速度和灌流时间;(e):将完全消化好组织分离出肝细胞,通过Percoll溶液离心获得纯化的仍保持活性的原代肝细胞。
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