[发明专利]丙酸氧化产氢产乙酸优势菌群的分离方法

摘要

丙酸氧化产氢产乙酸优势菌群的分离方法，它涉及一种产氢产乙酸菌的分离方法。它解决了现有分离方法存在分离困难及培养出的产氢产乙酸菌产氢率低的问题。分离方法：一、对厌氧活性污泥进行初步驯化；二、制菌悬液A；三、富集后菌悬液；四、将富集后菌悬液再次富集培养；五、制丙酸氧化产氢产乙酸菌和产甲烷菌的复合菌群；六、制丙酸氧化产氢产乙酸菌群；七、将丙酸氧化产氢产乙酸菌群转接丙酸培养基中进行培养；八、重复步骤七4～8次，即可分离。本发明方法分离容易，操作简单，分离出优势菌群的产氢率约为现有产氢菌产氢率的6～8倍。本发明优势菌群既可降解较高浓度丙酸，也可有效提高高浓度有机废水的处理效能。

主权项

丙酸氧化产氢产乙酸优势菌群的分离方法，其特征在于分离丙酸氧化产氢产乙酸优势菌群的方法按以下步骤实现：一、先以COD浓度为2000～10000mg/L的大豆蛋白废水为进水，再以四格室厌氧折流板反应器为模型，然后在进水pH为7.0～7.5、温度为35℃和HRT为48h的条件下对厌氧活性污泥进行初步驯化；二、将装有数颗玻璃球120mL的灭菌血清瓶中通入氮气，然后加入驯化后的第三格室厌氧折流板反应器中30～60mL厌氧活性污泥，封口，而后在温度为35℃、以130r/min的振速振荡1～2h，得菌悬液A；三、用无菌注射器取10～20mL的菌悬液A转接装有质量浓度为10000mg/L丙酸培养基的灭菌血清瓶中，然后在pH为7.0～7.5、温度为35℃以振速速率为130r/min条件下进行富集培养，得富集后菌悬液；四、在富集培养中丙酸培养基丙酸质量浓度小于1000mg/L的条件下，将富集后菌悬液转接装有质量浓度为10000mg/L丙酸培养基的灭菌血清瓶中，然后在pH为7.0～7.5、温度为35℃及振速速率为130r/min条件下再次进行富集培养；五、重复步骤四8～10次；得丙酸氧化产氢产乙酸菌和产甲烷菌的复合菌群；六、将丙酸氧化产氢产乙酸菌和产甲烷菌的复合菌群转接含有0.1～10mmol/L 2-溴乙烷磺酸钠的丙酸培养基中，然后在pH为7.0～7.5、温度为35℃及振速速率为130r/min条件下进行培养，得丙酸氧化产氢产乙酸菌群；七、在强化培养中含有0.1～10mmol/L2-溴乙烷磺酸钠的丙酸培养基的质量浓度小于3000mg/L的条件下，将丙酸氧化产氢产乙酸菌群转接含有0.1～10mmol/L2-溴乙烷磺酸钠的丙酸培养基中，然后在pH为7.0～7.5、温度为35℃以振速速率为130r/min条件下进行培养；八、重复步骤七4～8次，即可分离丙酸氧化产氢产乙酸优势菌群；其中步骤三中菌悬液A与丙酸培养基的体积比为1∶6；步骤四中富集后菌悬液与丙酸培养基的体积比为1∶6；步骤六中丙酸氧化产氢产乙酸菌和产甲烷菌的复合菌群与含有0.1～10mmol/L2-溴乙烷磺酸钠的丙酸培养基的体积比为1∶6；步骤七中丙酸氧化产氢产乙酸菌群与含有0.1～10mmol/L2-溴乙烷磺酸钠的丙酸培养基的体积比为1∶6。