[发明专利]两种抑制“肌肉生长抑制素基因”表达的合成小干扰RNA分子无效

专利信息
申请号: 200810072886.5 申请日: 2008-05-26
公开(公告)号: CN101591652A 公开(公告)日: 2009-12-02
发明(设计)人: 刘明军;马晓林;唐森;刘晨曦 申请(专利权)人: 新疆维吾尔自治区畜牧科学院中国-澳大利亚绵羊育种研究中心
主分类号: C12N15/11 分类号: C12N15/11;C12N15/79;C12N15/85
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 830000新疆维吾尔*** 国省代码: 新疆;65
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摘要: 发明公布了两种抑制“肌肉生长抑制素基因”的合成小干扰RNA分子。发明涉及对肌肉抑制素基因产生显著抑制作用的体外合成小干扰RNA分子的设计、合成和抑制效果的评价。根据GeneBank中MSTN序列设计siRNA分子群,选择针对不同位点的8条siRNA序列进行合成,siRNA单链分子经退火、连接到pSilence4.1专一表达载体上,构建pSi-MSTN表达质粒。脂质体转染小鼠成肌细胞C2C12,建立最佳外源基因转染条件。转染48小时后收集C2C12细胞,提取总RNA,通过实时定量荧光PCR检测肌肉细胞MSTN mRNA表达水平,分析siRNA对MSTN的干扰抑制作用。分析比较实验组和对照组细胞MSTN表达水平与肌细胞生长的相关性,评价siRNA对MSTN基因表达的阻断作用和促进肌肉细胞增殖生长的作用,获得pSi-717和pSi-986两种有效抑制MSTN基因表达的siRNA分子载体。
搜索关键词: 抑制 肌肉 生长 基因 表达 合成 干扰 rna 分子
【主权项】:
1 两个针对肌肉生长抑制素基因编码区的干扰RNA序列。
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