[发明专利]提高催化剂催化效能的微孔凝胶颗粒固定化细胞的方法

摘要

一种采用PVA-粘土-海藻酸钠等材料制备微孔凝胶颗粒固定化细胞的方法，用以提高催化剂中传质效率和胞内酶活性等催化效能。制备凝胶的过程中，采用了制药工艺中常见的湿法制粒，可制得500μm～1000μm的颗粒；运用海藻酸钠-氯化钙法化学固定化细胞，PVA冻融法物理固定化细胞增加了颗粒的机械强度；在磷酸盐溶液或其它钙离子络合剂中化学侵蚀海藻酸钙从而脱钙致孔，提高了传质效率；再用CTAB透性化细胞，搞高胞内酶的活性。本发明制备过程中条件温和，对细胞活性无损害。制得的颗粒均匀，且细胞载量较高，泄漏率低于10％。

主权项

1、一种提高催化剂中传质效率和胞内酶活性等催化效能的微孔凝胶颗粒固定化细胞方法，其主要步骤为：a)湿法制粒将一定量的细胞与适量的粘土混合，再加入适量的PVA水溶液和海藻酸钠溶液，搅拌，振荡，使之成为细小的颗粒。b)化学固化将颗粒投入适当浓度的CaCl2溶液中，经过适当的时间固化后，取出颗粒，洗涤；c)物理固化将洗涤后的颗粒表面吹干，随即冻融。再反复冻融；d)脱钙致孔将解冻后的颗粒置于适当浓度的磷酸缓冲液中，脱钙后经洗涤即得包埋了细胞的微孔凝胶颗粒。e)透性化将上述包埋了细胞的类球形颗粒，在十六烷基三甲基溴化胺溶液(CTAB)中，在4℃左右处理近10min，以使固定化细胞透性化。形成微孔凝胶颗粒固定化细胞的液体环境：所述PVA水溶液在0.01％～15％(W/V)；所述海藻酸钠浓度在0.01％～6％(W/V)；所述CaCl2溶液浓度在0.1％～20％(W/V)；所述的磷酸缓冲液pH在4～10，浓度为0.1～1mol/L；透性化处理所用CTAB溶液为0.01％到5％；透性化时间为1～60分钟。