[发明专利]强化白腐真菌分泌锰过氧化物酶的方法

摘要

强化白腐真菌分泌锰过氧化物酶的方法，它涉及一种白腐真菌的发酵方法。它解决了目前白腐真菌分泌(或发酵)锰过氧化物酶的周期长、且锰过氧化物酶产量低的问题。方法：1.将PDA固体培养基中生长旺盛的白腐真菌接种于无菌水中，充分振荡后过滤，再将滤液中的白腐真菌孢子接种到有泡沫载体的液体强化培养基；2.液体强化培养基用灭菌封口膜密封，然后置于37±1℃、转速为160r/min的环境中培养3天，即实现强化白腐真菌分泌锰过氧化物酶。本发明强化白腐真菌分泌锰过氧化物酶的方法在白腐真菌培养第3天时发酵液中出现酶活高峰，比现有白腐真菌发酵锰过氧化物酶的方法提前了3天，发酵周期缩短了一半。本发明方法锰过氧化物酶的产量高于900U/L，约是现有方法产酶量的4倍。

主权项

1、强化白腐真菌分泌锰过氧化物酶的方法，其特征在于强化白腐真菌分泌锰过氧化物酶按以下步骤进行：一、将PDA固体培养基中生长旺盛的白腐真菌接种于无菌水中，充分振荡后过滤，再将滤液中的白腐真菌孢子接种到有泡沫载体的液体强化培养基；二、液体强化培养基用灭菌封口膜密封，然后置于37±1℃、转速为160r/min的环境中培养3天，即实现强化白腐真菌分泌锰过氧化物酶；其中步骤一强化培养基中白腐真菌孢子的接种量为107/100mL；步骤一中1L液体强化培养基由10g葡萄糖、2g酒石酸铵、2.0g KH2PO4、0.535gMgSO4、0.1g CaCl2、20mmol乙酸-乙酸钠缓冲溶液、0.035g MnSO4、0.07g NaCl、0.007g CoCl2、0.007g FeSO4·7H2O、0.007g ZnSO4·7H2O、0.007g CuSO4、0.7mgAlK(SO4)2·12H2O、0.7mg Na2MoO4·2H2O、0.7mg H3BO3、0.105g次氮基三乙酸酯、0.105mmol藜芦醇和余量的水组成；步骤一100mL液体强化培养基中加入有1～1.4g泡沫载体。