[发明专利]一种具有降血糖生物活性的苦瓜多肽基因工程制备方法及应用

摘要

本发明提供了一种具有降血糖生物活性的苦瓜多肽基因工程制备方法及应用。本发明方法包括表达载体的构建，表达、纯化等。本发明方法能够定向、稳定、高效的表达出具有生物学活性的功能多肽，有利于工业化生产。经动物实验证明采用本发明制备的多肽能显著降低糖尿病模型动物的血糖值，可用于制备防治糖尿病的药物。

主权项

1、一种具有降血糖生物活性的苦瓜多肽的基因工程制备方法，其特征在于该方法包括下列步骤：(1)PCR法得到两端带有限制性酶切位点的有如SEQ ID：1寡核苷酸序列的具有降血糖生物活性的苦瓜多肽核苷酸编码序列；并进一步优化为SEQ ID：2；(2)将步骤(1)中得到的具有降血糖生物活性的苦瓜多肽核苷酸序列连结到表达载体中，得到具有降血糖生物活性的苦瓜多肽重组表达载体；(3)将步骤(2)中得到的具有降血糖生物活性的苦瓜多肽重组表达载体转化到大肠杆菌宿主中，并在表达步骤(1)中所述的具有降血糖生物活性的苦瓜多肽核苷酸编码序列的条件下，培养被转化的宿主细胞；(4)从步骤(3)培养的宿主细胞的培养基中和细胞内回收并纯化表达产物具有降血糖生物活性的苦瓜多肽。