[发明专利]一种从红树莓果实中提取超氧化物歧化酶的方法无效
申请号: | 200810012460.0 | 申请日: | 2008-07-23 |
公开(公告)号: | CN101633918A | 公开(公告)日: | 2010-01-27 |
发明(设计)人: | 张惠文;吕英杰;李旭;张成刚 | 申请(专利权)人: | 中国科学院沈阳应用生态研究所 |
主分类号: | C12N9/08 | 分类号: | C12N9/08 |
代理公司: | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 | 代理人: | 许宗富;周秀梅 |
地址: | 110016辽*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | 本发明属于生物技术领域,特别涉及利用生物技术从红树莓果实中提取超氧化物歧化酶(SOD)的方法。具体为以红树莓果实为原料,经抽提、盐析、柱层析和金属螯合亲和层析,制备出稳定的高活性的SOD。本发明所述红树莓果实中SOD的提取工艺,具有工艺简单、成本低、提取率高、对SOD产品活性损伤程度小、无环境污染且适合工厂化生产等特点。应用该方法提取的SOD具有活性高和稳定性好等特点,在医药、保健品及化妆品工业中具有巨大的应用潜力。 | ||
搜索关键词: | 一种 红树 果实 提取 超氧化物歧化酶 方法 | ||
【主权项】:
1.一种从红树莓果实中提取超氧化物歧化酶的方法,其特征在于按下述步骤:1)抽提:将磷酸盐缓冲液分两次加入到速冻红树莓中而后抽提,保留上清液待用;其中红树莓与磷酸盐缓冲液按1.0∶1.0-1.5(G∶V)混合;2)盐析:将上述上清液内先加入50%饱和度的硫酸铵再加入的90%饱和度的硫酸按,每次加入后均冷冻离心,取两次所得沉淀用磷酸盐缓冲液溶解;溶解后经聚乙二醇浓缩,浓缩液冷冻离心收集上清液;3)柱层析:将上述上清液用磷酸盐缓冲液洗进行柱层析,将各洗脱液经紫外检测收集230-500nm的活性峰,而后经聚乙二醇浓缩,浓缩液冷冻离心收集上清液,待用;4)金属螯合亲和层析将上述上清液上金属螯合亲和层析柱,用pH5.0柠檬酸缓冲液洗脱,将各洗脱液经紫外检测收集230-500nm的活性峰,经透析除去无机盐,即得超氧化物歧化酶。
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