[发明专利]一种人胚胎干细胞分化成平滑肌细胞的高效方法无效
申请号: | 200610154620.6 | 申请日: | 2006-11-10 |
公开(公告)号: | CN1952120A | 公开(公告)日: | 2007-04-25 |
发明(设计)人: | 姚行;张铭;黄华荣;陈良标;戴利成 | 申请(专利权)人: | 湖州市中心医院;浙江大学 |
主分类号: | C12N5/08 | 分类号: | C12N5/08 |
代理公司: | 杭州中成专利事务所有限公司 | 代理人: | 唐银益 |
地址: | 313000*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明属于人胚胎干细胞定向分化技术,旨在提供一种体外诱导人胚胎干细胞定向分化为平滑肌细胞的方法。该方法包括步骤:(1)人胚胎干细胞的培养;(2)用胰蛋白酶和EDTA消化分离成单细胞,培养后差别贴壁法获得纯化的人胚胎干细胞;(3)把分离纯化后的人胚胎干细胞接种在含诱导培养基I中培养10~15天,然后用诱导培养液II继续培养5~10天后,获得人平滑肌细胞。本发明具有方法简便、细胞分化均一度高,诱导周期短、效率高的优点。利用全反式维甲酸高效诱导人胚胎干细胞向平滑肌分化的体外系统,使平滑肌细胞在终级分化细胞中的比例达到93%以上。 | ||
搜索关键词: | 一种 胚胎 干细胞 化成 平滑肌 细胞 高效 方法 | ||
【主权项】:
1、一种人胚胎干细胞分化成平滑肌细胞的高效方法,其特征在于包括如下步骤:(1)人胚胎干细胞的培养;(2)用0.05~0.25%胰蛋白酶和0.02~0.04%EDTA消化分离成单细胞,转入培养瓶中培养1.5个小时,差别贴壁法获得纯化的人胚胎干细胞;(3)把分离纯化后的人胚胎干细胞接种在诱导培养基I中,37℃,5%CO2 的条件下培养10~15天,然后用诱导培养液II继续培养5~10天后,获得人平滑肌细胞。
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