[发明专利]小麦细胞周期蛋白基因及其分离方法与应用

摘要

本发明涉及小麦细胞周期蛋白CycD2基因WcycD2的克隆、重组及功能分析，属于分子生物学和生物技术领域。从小麦根尖中提取总RNA，然后将2微克总RNA反转录成cDNA。根据其它植物中的细胞周期蛋白CycD2中保守的氨基酸序列，设计引物，进行常规聚合酶链式反应(PCR)，然后连接到pGEM-T载体上，转化DH5α细胞，进行序列测定。然后进行3′和5′末端快速扩增获得全长的cDNA。进一步，构建正义表达载体，转化拟南芥。与野生型植物相比，转基因植株生长速率明显增加，生活周期缩短，提前成熟。该基因在拟南芥中过量表达能大大加速植物的生长进程。因此，该基因可用于转入小麦、水稻和玉米等农作物中，达到加速植物生长进程的目的，具有重要的应用前景。

主权项

1.一种克隆的小麦细胞周期蛋白基因WcycD2，其特征在于它具有下述所示的序列：1 TAATTGGCCA CGCGTCAAAA TAGTAAGGAG GAGGGGGGGG GATATAGTTT ATCCTTTTCG 6061 TTTATCTCTT TGACGGATCA AGAACAGGGG AGGGAGATTG AAGGGGGGGA GGAAGCTATG 120121 CATCCAACGC GTTGGGAGCT CTCCCATATG GTCGACCTGC AGGCGGCCGC GAATTCACTA 180181 GTGATTTCTC TAGATAAATC AGTTCTCGCA TCGGTTTATT GATTGCTCAT TAACCCAGCA 240241 TTCCCGCCGC TGCCATTCTT GGGAGGAGTC AGCATGGTTC CGTCCGGGTA CGACTGCGCC 300301 GCCTCCGTCC TGCTCTGCGC CGAGGACAAC GCCGCCATCC TCGGCCTCGA CGACGACGAG 360361 GAAGACTGCT CCTGGGCGGC GGCGGCCGCC ACCCCGCCGC GCATCGCCGC CGATGCCGCC 420421 GCGGCGGCGG AGGGGTTCCT GGTGGACCAC CCCGTGCAGT CCGATGAGTG CGTGGCGGCG 480481 CTCGTCGAGA CGGAGAAGGA GCACATGCCC GCCGACGGGT ACCCCCAGAT GCTGCTGCGC 540541 CGGCCCGGGG CCCTGGATTT GGCCGCCGTC AGGAGGGACG CCATAGATTG GATTTGGGAG 600601 GTCATTGAGC ATTTCAATTT CGCGCCGTTG ACTGCGGTCC TGTCTGTCAA CTACCTTGAT 660661 AGGTTCCTCT CCGTCTATCC CCTTCCTGAA GGCAAAGCTT GGGTGACACA GCTCTTGGCA 720721 GTGGCTTGCT TGTCCCTCGC TTCAAAGATG GAGGAGACCT ATGTGCCGCT CCCCGTCGAC 780781 CTGCAGGTGG TTGAGGCAAA TTCTGCGTTC GAGGGGAGGA CCATAAAAAG GATGGAGCTT 840841 TTGGTGCTCA GCACCTTAAA ATGGAGGATG CAAGCTGTTA CTGCTTGCTC ATTTATTGAC 900901 TACTTCCTGC GCAAATTCAA TGATCATGAC GCGCCCTCCA TGCTCGCATT CTCCCGCTCG 960961 ACCGACCTCA TCCTGAGCAC AGCTAAAGGA GCTGATTTTT TGGTGTTCAG ACCTTCAGAG 10201021 ATTGCTGCAA GTGTCGCACT TGCCGCATTT GGGGAGCGCA ATACTTCAGT AGTCGAGCGG 10801081 GCTACAACTA CTTGCAAGTT CATAAACAAG GAGCGAGTGT TAAGATGCTA CGAACTGATT 11401141 CAAGACAAGG TAGCAATGGG AACCATTGTC CTAAAGTCAG CTGGATCATC AATGTTCTCT 12001201 GTGCCGCAAA GCCCGATAGG CGTGTCGGAT GCTGCTGCAT GTCTCAGCCA ACAGAGTGAT 12601261 GATACTGCTG TTGGATCTCC AGCAACATGC TACCAAGCCT CTTCGGCAAG CAAAAGGAGG 13201321 AGAATTGGCA GATGACCGAT CTCATGTCGT GCTGTGCTTC AGGTGTGTTG CTCACCGTTT 13801381 TGGCTGTTTT GTTGTTTCAA ACATCTCAAT TCAGTTTGGT CACTCGAGAA CTATAGTGTG 14401441 GTCAAGTAGT TGCTGGAAGG AACAAAAACA CCATAGTCAA TACTTGACCC ATAAGAACAA 15001501 ACAGTTCGCC GCGAGCCTGT TCATGCAATC GACATATGTA AGGGGCATGC TAAGCTGTTA 15601561 GTGTCCTGAG ATGCATGCTG TGTAGGCAGA GATGGAGCAA GGAAGTTGCA TGTTGTAGAG 16201621 ATGAGAGCTC TATTGCCCTG TTTTGTATTT TGGTTCCATA TTCAGTTTCT AATGAACTTT 16801681 AGGCAAGGGC TGCTCTGATC ATTGAGGCGG TGAATGAAAA TGATCCTAAA ACGGATCGGC 17401741 TGAGATACAG AACAGTTTAT ATTTGTTCTG ATGAGTTATA AATTTTGTCG ACAAAAAAAA 18001801 AAAAAAAAAA AAAAA 1815