本发明提供了热稳定性增加的单链结合蛋白突变体、核苷酸序列及应用，旨在解决现有的单链结合蛋白突变体热稳定性较差的问题。本发明提供了一种热稳定性增加的单链结合蛋白突变体，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明的单链结合蛋白突变体具有更好的的热稳定性，与野生型蛋白需保存在﹣20℃条件下不同，本发明的单链结合蛋白突变体可实现常温存储运输。此外，在60‑65℃恒温扩增反应条件下，该突变体蛋白相比野生型具有更好的反应性能。
本发明公开了一种对虾肝肠胞虫（EHP）RAA恒温荧光检测方法和检测试剂盒。检测试剂盒包括一条正向引物SEQ ID NO.1、一条反向引物SEQ ID NO.2、一条特异性荧光探针SEQ ID NO.3、反应液、重组聚合酶和对照品。本发明的试剂盒特异性强；检测灵敏度高，可达到100fg/μL；准确度高、可靠；操作简便快捷，适合现场检测，具有广泛的应用场景。
本发明公开了一种对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒（IHHNV）RAA恒温荧光检测方法和检测试剂盒。检测试剂盒包括一条正向引物SEQ ID NO.1、一条反向引物SEQ ID NO.2、一条特异性荧光探针SEQ ID NO.3、反应液、重组聚合酶和对照品。本发明的试剂盒特异性强；检测灵敏度高，可达到0.32fg/μL；准确度高、可靠；操作简便快捷，适合现场检测，具有广泛的应用场景。
本发明公开了一种虾虹彩病毒（SIV）RAA恒温荧光检测方法和检测试剂盒。检测试剂盒包括一条正向引物SEQ ID NO.1、一条反向引物SEQ ID NO.2、一条特异性荧光探针SEQ ID NO.3、反应液、重组聚合酶和对照品。本发明的试剂盒特异性强；检测灵敏度高，可达到2fg/μL；准确度高、可靠；操作简便快捷，适合现场检测，具有广泛的应用场景。
本发明属于分子生物学技术领域，公开了一种非洲猪瘟病毒CD2V基因的RAA恒温荧光检测引物探针组、试剂盒及方法。本发明的引物探针组的正向引物核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，反向引物核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，特异性荧光探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.3，其中，所述特异性荧光探针的5’端方向标记有荧光报告基团，3’端方向标记有荧光淬灭基团。本发明所提供的引物探针组及试剂盒可以在等温条件下快速、方便、高效、特异地检测样本中是否是否感染非洲猪瘟野毒株或CD2V缺失株，在现场不需要复杂仪器和专业设备，适宜于POCT。
本发明属于分子生物学技术领域，公开了一种非洲猪瘟病毒CD2V基因的实时荧光PCR检测引物探针组、试剂盒及检测方法。本发明的引物探针组的正向引物核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，反向引物核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示，特异性荧光探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示，其中，所述特异性荧光探针的5’端标记有荧光报告基团，3’端标记有荧光淬灭基团。本发明所提供的引物探针组及试剂盒可以快速、方便、高效、特异地检测样本中是否含有非洲猪瘟病毒及鉴别是否为CD2V基因缺失，适宜于临床的鉴别检测。
本发明属于分子生物学技术领域，公开了一种非洲猪瘟病毒VP72基因及CD2V基因荧光检测引物探针组、试剂盒及方法。本发明的引物探针组针对VP72基因，正向引物核苷酸序列如SEQ ID NO.1，反向引物核苷酸序列如SEQ ID No.2所示，特异性荧光探针核苷酸序列如SEQ ID No.3所示，针对CD2V基因，正向引物核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示，反向引物核苷酸序列如SEQ ID No.11所示，特异性荧光探针核苷酸序列如SEQ ID No.12，其中，所述特异性荧光探针的5’端标记有荧光报告基团，3’端标记有荧光淬灭基团。本发明在一次扩增反应中同时检测两种基因，实现了对非洲猪瘟病毒的野毒株和CD2V基因缺失疫苗株进行简便、快捷、准确、特异性检测的目的。
本发明公开了一种细菌性败血症（FBS）RAA恒温荧光检测方法和检测试剂盒。检测试剂盒包括一条正向引物SEQ ID NO.1、一条反向引物SEQ ID NO.2、一条特异性荧光探针SEQ ID NO.3、反应液、重组聚合酶和对照品。本发明的试剂盒特异性强；检测灵敏度高，可达到0.1fg/μL；准确度高、可靠；操作简便快捷，适合现场检测，具有广泛的应用场景。
本发明公开了一种哈维氏弧菌（VHV）RAA恒温荧光检测方法和检测试剂盒。检测试剂盒包括一条正向引物SEQ ID NO.1、一条反向引物SEQ ID NO.2、一条特异性荧光探针SEQ ID NO.3、反应液、重组聚合酶和对照品。本发明的试剂盒特异性强；检测灵敏度高，可达到300fg/μL；准确度高、可靠；操作简便快捷，适合现场检测，具有广泛的应用场景。
本发明公开了一种鲤春病毒血症病毒（SVCV）RAA恒温荧光检测方法和检测试剂盒。检测试剂盒包括一条正向引物SEQ ID NO.1、一条反向引物SEQ ID NO.2、一条特异性荧光探针SEQ ID NO.3、反应液、逆转录酶、重组聚合酶和对照品。本发明的试剂盒特异性强；检测灵敏度高，可达到0.1fg/μL；准确度高、可靠；操作简便快捷，适合现场检测，具有广泛的应用场景。
本发明公开了一种罗湖病毒（TiLV）RAA恒温荧光检测方法和检测试剂盒。检测试剂盒包括一条正向引物SEQ ID NO.1、一条反向引物SEQ ID NO.2、一条特异性荧光探针SEQ ID NO.3、反应液、逆转录酶、重组聚合酶和对照品。本发明的试剂盒特异性强；检测灵敏度高，可达到10fg/μL；准确度高、可靠；操作简便快捷，适合现场检测，具有广泛的应用场景。
本发明公开了一种草鱼出血病2型病毒（GCRV‑2）RAA恒温荧光检测方法和检测试剂盒。检测试剂盒包括一条正向引物SEQ ID NO.1、一条反向引物SEQ ID NO.2、一条特异性荧光探针SEQ ID NO.3、反应液、逆转录酶、重组聚合酶和对照品。本发明的试剂盒特异性强；检测灵敏度高，可达到1fg/μL；准确度高、可靠；操作简便快捷，适合现场检测，具有广泛的应用场景。
本发明公开了一种锦鲤疱疹病毒（KHV）RAA恒温荧光检测方法和检测试剂盒。检测试剂盒包括一条正向引物SEQ ID NO.1、一条反向引物SEQ ID NO.2、一条特异性荧光探针SEQ ID NO.3、反应液、重组聚合酶和对照品。本发明的试剂盒特异性强；检测灵敏度高，可达到100fg/μL；准确度高、可靠；操作简便快捷，适合现场检测，具有广泛的应用场景。
本发明公开了一种传染性造血器官坏死症病毒（IHNV）RAA恒温荧光检测方法和检测试剂盒。检测试剂盒包括一条正向引物SEQ ID NO.1、一条反向引物SEQ ID NO.2、一条特异性荧光探针SEQ ID NO.3、反应液、逆转录酶、重组聚合酶和对照品。本发明的试剂盒特异性强；检测灵敏度高，可达到0.1fg/μL；准确度高、可靠；操作简便快捷，适合现场检测，具有广泛的应用场景。
