一种重组Ⅲ型人源化胶原蛋白C3及其表达载体、表达菌株、表达方法和应用,涉及基因工程、合成生物学领域;其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明剔除已知序列人Ⅲ型胶原蛋白中的非CTHR区,优选CTHR区与保留的N‑端和C‑端的非螺旋区编辑重组而成的加强版微型人胶原蛋白,其核心功能区序列与人胶原蛋白对应部分100%相同,应用于人体中不会造成免疫排斥反应。其稳定性高,同时具有高拉伸强度、生物降解性能、亲水性较好与促进细胞生长、促进细胞粘附、促进胶原密度增加、与新生细胞和组织协同修复创伤等特性,在化妆品、医疗和食品领域极具应用前景。该菌株有效、稳定,制备方法简单,可在低成本下获得较高产量,易于工业化。
一种超氧化物歧化酶融合多肽及其制备方法和在制备抗衰老产品中的应用,涉及基因工程、合成生物技术领域。重组SOD酶融合多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示,是将耐热性强的mPeSOD2‑1,与高功能但不稳定的人源化细胞修复多肽进行融合表达。利用mPeSOD2‑1作为伴体蛋白,保护修复多肽,抵抗高温和降解,且保留两者的生物活性。高温孵育后,融合多肽既具有强抗氧化性,有利于清除过多有害的氧自由基,保护和修复细胞,也具有养护细胞,促细胞增殖,修复机体损伤的作用。融合多肽稳定性强,活性高,工业实用性强,在制备延缓机体衰老,促进机体和皮肤新生的抗衰老化妆品、保健食品等领域中具有广阔的应用前景。
一种高稳定性超氧化物歧化酶突变体及其表达方法和应用,涉及生物工程技术领域;包括命名为mPeSOD2‑1的SOD突变体,其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明的一种高稳定性超氧化物歧化酶突变体,以PeSOD2转录变异体为模板,进行多点突变(N9S,N15K,P41L)获得;其耐热性强,在90℃处理60min以内,对活性无显著影响;同时稳定性高,耐酸碱性能优异,在pH值为pH5.5‑8的范围内酶活稳定,且‑80℃速冻和反复冻融至少3次以内对活性无影响。高稳定的抗氧化能力可以经受化妆品、食品、保健品等生产加工环节,以保证最终产品作用至人体时的依旧保持高抗氧化活性,抵御因过量自由基导致的机体衰老。
一种高活性超氧化物歧化酶(SOD)及其制备方法和在制备抗氧产品中的应用,涉及生物工程技术领域;包括以下步骤:(1)根据目的SOD酶的氨基酸序列,按照毕赤酵母菌密码子优化,人工合成cDNA;所述cDNA的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示;(2)将所述cDNA序列克隆至pPICZaA质粒中,构建重组载体;(3)将所述重组载体转入毕赤酵母菌中,培养并诱导表达,得到高活性超氧化物歧化酶。本SOD容易被皮肤及身体吸收利用。既保留了把自由基转化为水和氧气的第一级抗氧化物的高活性,又实现了耐热性强、稳定性高的特点。在化妆品、保健食品等产品中可保证持久、有效清除自由基对机体造成的损害,延缓机体衰老,在制备抗氧产品的领域中具有良好的应用前景。