本发明涉及一种用于核酸斑点杂交法检测马铃薯A病毒的探针、其制备方法及试剂盒,属于马铃薯病毒检测技术领域。为解决现有核酸斑点杂交法检测马铃薯A病毒时使用的探针产量低、成本高的问题,本发明提供了一种用于核酸斑点杂交法检测马铃薯A病毒的探针,其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明探针只在反向引物5’端标记有地高辛,保证显色效果的同时降低了探针对保存条件的要求。本发明的制备方法提高了探针产量,降低了探针的制备成本,灵敏度更高。本发明提供的检测试剂盒,简化了检测程序,对检测设备的要求更低,检测场所的适应性更广,更便于马铃薯A病毒的田间检测和口岸检疫,能够显著提高马铃薯A病毒的检测效率。
本发明涉及核酸斑点杂交法检测PSTVd的探针及其制备方法、试剂盒与检测方法,属于马铃薯病毒检测技术领域。为解决现有探针成本高、检测程序复杂的问题,本发明提供了一种核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的核酸斑点杂交法检测PSTVd的探针,该探针以阳性cDNA为模板,采用PCR扩增的方式制备,制备方法简便、产量高、成本低。本发明将待测样品的核酸固定于正电荷尼龙膜上,用带有Dig标记的探针与待测样品的核酸进行杂交,通过标记物的颜色反应检测PSTVd的有无。本发明能够检测到更低含量的核酸,灵敏度更高;仅需粗提核酸即可进行检测,简化了检测程序,更易于操作,对检测设备的要求低,检测场所的适应性广。