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[发明专利]一种高效生产四氢嘧啶的重组大肠杆菌及其构建方法-CN202310870816.9在审
发明人：吴静;武耀运;刘立明;宋伟;刘佳;魏婉清;张岚东 -专利权人：江南大学
申请日： 2023-07-14 - 公布日： 2023-10-20 - 主分类号： C12N9/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种高效生产四氢嘧啶的重组大肠杆菌及其构建方法，属于生物工程领域。本发明以大肠杆菌BL21为宿主，pET等系列质粒为载体，在胞内异源表达L‑二氨基丁酸转氨酶(EctBT15S/T49A/Y293M)、L‑二氨基丁酸乙酰转移酶(EctA)和四氢嘧啶合成酶(EctC)，通过质粒拷贝数优化得到最优表达载体及基因组合方式，并通过不同水平RBS调控三酶表达水平从而进一步优化体内三酶的酶活比例。以最优重组菌株作为生物催化剂进行全细胞转化，四氢嘧啶最高产量达到87.36g/L。该生产过程简单、原料易得、杂质少，具有较好的工业化应用前景。
一种高效生产嘧啶重组大肠杆菌及其构建方法

[发明专利]一株产己二酸的重组大肠杆菌的构建及其应用-CN202310951198.0在审
发明人：刘立明;袁炜佳;高聪;陈修来;刘佳;李晓敏;宋伟;魏婉清;吴静 -专利权人：江南大学
申请日： 2023-07-31 - 公布日： 2023-10-20 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一株产己二酸的重组大肠杆菌的构建及其应用，属于生物技术领域。本发明将大肠杆菌进行改造，敲除了3‑脱氢莽草酸脱氢酶基因aroE、负调控转录抑制因子tyrR、乙酸激酶基因ackA、丙酮酸脱氢酶基因poxB和奎尼酸脱氢酶基因YdiB，过表达了aroB、aroD、aroGFBR、ppsA、tktA、talA、GsQOR和gdh，并通过RBS序列调控己二酸生产的靶点基因片段烯酸还原酶编码基因GsQOR和葡萄糖脱氢酶编码基因gdh的表达强度，再过表达调控顺,顺‑粘康酸的靶点基因aroZ、aroY和catA，最后经发酵放大验证己二酸产量，在48h达5.3g/L。本发明为从顺,顺‑粘康酸生产己二酸提供了新方法，具有较好发展前景，有利于用于工业化生产。
一株产己二酸重组大肠杆菌构建及其应用

[发明专利]一种1,3-丙二醇脱氢酶突变体及产1,3-丙二醇的克雷伯氏菌-CN202310775863.5在审
发明人：刘立明;张少伦;高聪;刘佳;陈修来;吴静;宋伟;魏婉清 -专利权人：江南大学
申请日： 2023-06-28 - 公布日： 2023-09-05 - 主分类号： C12N9/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种1,3‑丙二醇脱氢酶突变体及产1,3‑丙二醇的克雷伯氏菌，属于生物技术领域。本发明以Klebsiella pneumoniae ATCC 13883为出发菌株，通过敲除编码α‑乙酰乳酸脱羧酶的budA基因，编码d‑乳酸脱氢酶LDH的ldhA基因，编码乙醛脱氢酶ALDH的aldA基因，PTS转运系统关键酶编码基因crr，过表达甘油脱水酶基因dhaB和苹果酸酶基因maeB、来自大肠杆菌的醛基还原酶基因yqhD和突变后的1,3‑丙二醇脱氢酶dhaT，获得了重组克雷伯氏菌KP‑FMME；利用此重组菌株进行5L发酵罐发酵，经发酵条件优化，重组克雷伯氏菌KP‑FMME以甘油为原料发酵48h，可生产130g/L的1,3‑丙二醇，具有十分广阔的应用前景。
一种丙二醇脱氢酶突变体克雷伯氏菌

[发明专利]一株谷氨酸棒杆菌及其在产L-赖氨酸中的应用-CN202310723743.0在审
发明人：刘立明;刘佳;陈修来;高聪;宋伟;魏婉清;吴静;周怡雯 -专利权人：江南大学
申请日： 2023-06-19 - 公布日： 2023-08-29 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明公开了一株谷氨酸棒杆菌及其在产L‑赖氨酸中的应用，属于生物技术领域。本发明通过对谷氨酸棒杆菌的诱变和适应性进化筛选，筛选出能耐受高浓度赖氨酸的L‑赖氨酸产生菌来生产赖氨酸，命名为谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)FMME‑L007，已于2023年05月12日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M 2023742。并对其进行改造，构建了一株重组谷氨酸棒杆菌，经过发酵条件优化，L‑赖氨酸盐酸盐产量达到270.5g/L，相对于葡萄糖的得率为0.72g/g。本发明所得生产菌株潜力大，且发酵生产L‑赖氨酸的方法工艺操作简单易行、培养基成本低廉，提高了赖氨酸葡萄糖得率和生产经济性，适用于工业化生产。
谷氨酸杆菌及其赖氨酸中的应用

[发明专利]一株产丁二酸的酿酒酵母及其应用-CN202310228686.9有效
发明人：刘立明;刘佳;陈修来;高聪;王学明;吴静;宋伟;魏婉清 -专利权人：江南大学
申请日： 2023-03-10 - 公布日： 2023-08-08 - 主分类号： C12N1/18 文献下载
摘要：本发明公开了一株产丁二酸的酿酒酵母及其应用，属于生物工程技术领域。所述酿酒酵母已于2023年2月9日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M 2023098，保藏地址为中国武汉，武汉大学。本发明的酿酒酵母FMME‑SuA912，表现出耐受低pH的能力，可以在pH 3.5条件下正常生长并发酵产丁二酸。经发酵罐扩大培养，发酵120h丁二酸产量和产率分别达到了41.8g/L和0.34g/g，具有低pH发酵生产丁二酸的工业化应用潜力。
一株产丁二酸酿酒酵母及其应用

[发明专利]一种全细胞催化生产1,4-丁二醇的方法及其应用-CN202310615429.0在审
发明人：刘立明;倪平;高聪;刘佳;陈修来;宋伟;魏婉清;吴静 -专利权人：江南大学
申请日： 2023-05-26 - 公布日： 2023-07-18 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种全细胞催化生产1,4‑丁二醇的方法及其应用，属于生物化工技术领域。本发明以大肠杆菌为出发菌株，通过过表达五个外源基因：ɑ‑酮戊二酸脱羧酶SucA、NADH依赖性的4‑羟基丁酸脱氢酶4Hbd、羧酸还原酶Car、4'‑磷酸泛酰氨基转移酶sfp和醇脱氢酶AdhE获得了重组大肠杆菌；利用此重组菌株进行全细胞催化，可以在温和条件下利用α‑酮戊二酸生产1,4‑丁二醇，具有十分广阔的应用前景。
一种细胞催化生产丁二醇方法及其应用

[发明专利]一种重组大肠杆菌及其构建方法与其在生产3-脱氢莽草酸中的应用-CN202310607545.8在审
发明人：刘立明;王明;高聪;刘佳;陈修来;宋伟;魏婉清;吴静 -专利权人：江南大学
申请日： 2023-05-26 - 公布日： 2023-07-14 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明涉及一种重组大肠杆菌及其构建方法与其在生产3‑脱氢莽草酸中的应用。本发明所述重组大肠杆菌在大肠杆菌宿主菌中，敲除3‑脱氢莽草酸脱氢酶基因aroE、负调控转录抑制因子tyrR、乙酸激酶基因ackA、丙酮酸脱氢酶基因poxB和奎尼酸脱氢酶基因YdiB，并过量表达磷酸烯醇式丙酮酸合酶ppsA、转酮醇酶tktA和转醛缩酶talA、DHQ合酶aroB、3‑脱氢奎尼酸脱水酶aroD和抗反馈抑制的3‑脱氧‑D‑阿拉伯庚酮糖‑7‑磷酸(DAHP)合成酶基因aroGFBR。本发明发酵生产3‑脱氢莽草酸的工艺操作简单易行、培养基成本低廉，适用于工业化生产。
一种重组大肠杆菌及其构建方法与其生产脱氢莽草中的应用

[发明专利]一种不透明红球菌L-氨基酸氧化酶突变体及其应用-CN202310078769.4在审
发明人：吴静;武耀运;何志震;陶金阳;李春旺;马腾飞;闫昕;苗登路;刘立明;宋伟;魏婉清;周怡雯;陈修来;刘佳;高聪 -专利权人：江南大学
申请日： 2023-02-03 - 公布日： 2023-06-23 - 主分类号： C12N9/06 文献下载
摘要：本发明涉及一种不透明红球菌L‑氨基酸氧化酶突变体及其应用，属于生物工程技术领域。本发明克服了野生型RoLAAO催化性能差的局限，通过麦芽糖蛋白工程及组合突变设计出突变体RoLAAOY226H/D227H/Y371L/A466C/W467A，其对五种选定底物催化效率为野生型的9.2‑82.8倍，能够以L‑氨基酸(L‑Leu、L‑Ile、L‑Met、L‑Val及L‑Phe)为底物规模化制备系列α‑酮酸(α‑酮亮氨酸、α‑酮异亮氨酸、α‑酮蛋氨酸、α‑酮缬氨酸及α‑苯丙酮酸)，对应产量101g/L，转化率95％，单位菌体生产α‑酮酸的能力在5.1‑5.5g/g，为多种α‑酮酸的工业化生产奠定了基础。
一种不透明球菌氨基酸氧化酶突变体及其应用

[发明专利]一种普通变形杆菌内消旋-二氨基庚二酸脱氢酶突变体及其应用-CN202211708911.0在审
发明人：刘立明;吴天福;宋伟;魏婉清;吴静;陈修来;郭亮;刘佳;高聪 -专利权人：江南大学
申请日： 2022-12-29 - 公布日： 2023-03-28 - 主分类号： C12N9/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种普通变形杆菌内消旋‑二氨基庚二酸脱氢酶突变体及其应用，属于生物工程技术领域。本发明构建了PvDAPDH突变体，与野生酶相比，能催化多种芳香族α‑酮酸合成D‑氨基酸，立体选择性可达95％，本发明构建的pvDAPDH三突变体W121I/H227I/R181S表现出对不同大体积芳香族α‑酮酸底物较好的兼容性，能同时催化大多数芳香族α‑酮酸底物转化成D‑氨基酸，对2‑氧代‑4‑苯基丁酸表现出较高催化活性，产物D‑高苯丙氨酸产量达到2.1g/L。本发明有效扩展了生物法合成芳香族D‑氨基酸工具箱。
一种普通变形杆菌内消旋二氨基庚二酸脱氢酶突变体及其应用

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