本发明属于酶基因工程及酶工程领域，涉及一种邻硝基苯甲酸降解酶的编码基因及其应用。一种邻硝基苯甲酸降解酶的编码基因(基因nbaB)，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。一种所述的编码基因所编码的蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明从Pseudomonas sp.ONBA-17中克隆得到负责2-NBA代谢的基因片段——nbaB。本发明能够为2-NBA的降解提供有效的生物技术手段，对于2-NBA污染环境的修复具有重要意义。
本发明属于酶基因工程及酶工程领域，涉及一种去除邻硝基苯甲酸的酶制剂及应用。一种去除邻硝基苯甲酸的酶制剂，所述的酶制剂为水溶液或缓冲溶液，包含一种邻硝基苯甲酸降解酶，其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，以及终浓度为0.1-0.3mM的MgCl2，反应体系pH值为6.0-8.0。酶制剂为缓冲溶液时，该缓冲溶液一般为pH值7.2-7.7的50-100mM磷酸钠缓冲液或磷酸钾缓冲液。
本发明属于酶基因工程及酶工程领域，涉及一种去除邻硝基苯甲醛的酶制剂及应用。一种去除邻硝基苯甲醛的酶制剂，其特征在于：所述的酶制剂为水溶液或缓冲溶液，包含一种邻硝基苯甲醛降解酶，其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，以及终浓度为0.1-0.3mM的CaCl2，反应体系pH值为6.5-8.0。酶制剂为缓冲溶液时，该缓冲溶液一般为pH值7.2-7.7的50-100mM磷酸钠缓冲液或磷酸钾缓冲液。所述的邻硝基苯甲醛降解酶的纯酶含量为0.03-0.1mg/mL。本发明的酶制剂通过优选添加金属化合物，使得本发明的酶制剂酶活高，降解ONBA效果优异；所采用的微生物降解酶采用基因工程手段制备，成本低，有利于大规模推广；采用酶法降解ONBA，不仅效果好，且操作简单、安全、所需反应条件温和，不形成二次污染。
本发明属于酶基因工程及酶工程领域，涉及一种去除邻硝基苯甲酸的酶制剂及应用。一种去除邻硝基苯甲酸的酶制剂，所述的酶制剂为水溶液或缓冲溶液，包含一种邻硝基苯甲酸降解酶，其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，以及终浓度为0.1-0.3mM的MnCl2，反应体系pH值为6.0-8.0。酶制剂为缓冲溶液时，该缓冲溶液一般为pH值7.2-7.7的50-100mM磷酸钠缓冲液或磷酸钾缓冲液。
本发明属于酶基因工程及酶工程领域，涉及一种去除邻硝基苯甲醛的酶制剂及应用。一种去除邻硝基苯甲醛的酶制剂，所述的酶制剂为水溶液或缓冲溶液，包含一种邻硝基苯甲醛降解酶，其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，以及终浓度为0.1-0.3mM的MgCl2，反应体系pH值为6.5-8.0。酶制剂为缓冲溶液时，该缓冲溶液一般为pH值7.2-7.7的50-100mM磷酸钠缓冲液或磷酸钾缓冲液。酶制剂中邻硝基苯甲醛降解酶的纯酶含量一般为0.03-0.1mg／mL。本发明的酶制剂通过优选添加金属化合物，使得本发明的酶制剂酶活高，降解ONBA效果优异；所采用的微生物降解酶采用基因工程手段制备，成本低，有利于大规模推广；采用酶法降解ONBA，不仅效果好，且操作简单、安全、所需反应条件温和，不形成二次污染。
本发明属于酶基因工程及酶工程领域，涉及一种邻硝基苯甲醛降解酶、其编码基因及其应用。一种邻硝基苯甲醛降解酶(NbaA酶)，其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。所述的邻硝基苯甲醛降解酶的编码基因(基因nbaA)，其核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明通过克隆Pseudomonas sp.ONBA-17中负责ONBA降解的脱氢酶基因并表达，获得了ONBA降解酶，为ONBA的降解提供有效的生物降解手段，对于ONBA污染环境的修复具有重要意义。本发明得到的NbaA酶对ONBA的酶活力为2442U／mg，分别是NahF酶活力(552U／mg)和NahV酶活力(245U／mg)的442.4％和996.7％，显著强于二者。而nbaA同nahF和nabV的序列同源性分别为62％和89％。由上可知，基因序列的不同引发了酶的空间构象的差异，并最终致使酶作用能力产生差异。
