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[发明专利]一种兔球虫病活疫苗及其制备方法和应用-CN201911103111.4有效
发明人：索勋;刘贤勇;索静霞;李超;顾小龙;汤新明;汪运舟;崔玉娟;陶鸽如;王丹;廖琴;成霞;罗光琴;邓梦青;吕艳丽 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2019-11-12 - 公布日： 2021-06-15 - 主分类号： A61K39/012 文献下载
摘要：本发明涉及动物球虫病疫苗技术领域，具体涉及一种兔球虫病活疫苗及其制备方法和应用。本发明提供一种兔球虫病活疫苗组合物，其包含大型艾美耳球虫、肠艾美耳球虫和中型艾美耳球虫的早熟致弱虫株以及穿孔艾美耳球虫的早熟致弱虫株。本发明提供的兔球虫病活疫苗同时具有较高的免疫保护效力和安全性，能够有效防治兔球虫病，减少或杜绝抗球虫药物的使用，同时显著降低疫苗接种对于兔体重增重等生长和生产性能的不利影响，具有良好的经济效益和广阔的应用前景。本发明还提供球虫早熟致弱虫株的选育方法，该方法能够有效缩短早熟虫株的选育周期，提高球虫早熟致弱虫株的选育效率，获得的早熟虫株的遗传特性稳定、致病性显著降低、免疫原性良好。
一种球虫病疫苗及其制备方法应用

[发明专利]一种艾美耳球虫冻存剂及冻存方法-CN201710567585.9有效
发明人：索勋;刘贤勇;段春慧;索静霞;向碧琪;郝振凯;韩贞艳;毕菲菲;陶鸽如;李超;张思新;王超越;顾小龙;汤新明;胡丹丹;于咏兰 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2017-07-12 - 公布日： 2021-02-19 - 主分类号： A01N1/02 文献下载
摘要：本发明涉及一种艾美耳球虫冻存剂，所述冻存剂中包括冻存液和冷冻保护剂；所述冻存液中包括蔗糖、磷酸二氢钾、三水合磷酸氢二钾、L‑谷氨酸和小牛血清蛋白；所述冷冻保护剂为二甲基亚砜单体或包括二甲基亚砜的组合物。上述的冻存剂可分别制备成适用于孢子囊和卵囊冻存的冻存剂。采用本发明的冻存剂可将艾美耳球虫在液氮中长期进行保存，解决了艾美耳球虫需不断传代保种的不便。
一种艾美耳球虫冻存剂方法

[发明专利]一种永生化兔小肠上皮细胞系及其构建方法-CN201710459402.1在审
发明人：刘贤勇;索勋;杜孟泽;索静霞;陶鸽如;胡丹丹 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2017-06-16 - 公布日： 2017-09-29 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明涉及分子生物学领域，具体公开了一种永生化兔小肠上皮细胞系及其构建方法。采集新生兔的小肠，利用含有胶原酶和中性蛋白酶的酶消化液进行消化，消化后使用重悬离心和相差贴壁的方法对隐窝细胞团进行提纯，可获得高纯度的原代隐窝上皮细胞。这类隐窝上皮细胞可进行培养与传代。对获得的隐窝上皮细胞进行脂质体转染表达SV40大T抗原的质粒，再连续细胞传代最终筛选得到一株永生化兔小肠上皮细胞系。该永生化兔小肠上皮细胞系可同时表达肠上皮表面标志分子和隐窝基层干细胞的表面分子。所述肠上皮表面标志分子包括但不限于角蛋白8，E‑降钙素和ki67；所述隐窝基层干细胞的表面分子包括但不限于Lgr5，sox9。所述永生化兔小肠上皮细胞系可应用于建立兔小肠上皮体外模型，用于研究营养吸收机理，细胞通路挖掘，和病原体体外培养等方向。
一种永生小肠上皮细胞系及其构建方法