本发明公开一种基于体外滚环复制的PCV2毒株感染性克隆构建试剂盒及方法。所述基于体外滚环复制的PCV2毒株感染性克隆构建试剂盒中含有如下引物:PCV2特异性上游引物:5’‑CCATATGAAATAAATTACTGAG‑3’(SEQ ID NO.1);PCV2特异性下游引物:5’‑CAGCGCACTTCTTTCGTTTTCAG‑3’(SEQ ID NO.2);随机引物:5′‑NNNNNN‑3′(SEQ ID NO.3)。PCV2毒株感染性克隆的方法是利用上述引物对PCV2 DNA进行多引物滚环扩增后得到PCV2全基因组,然后将全基因组通过单酶切分离纯化后连接,并重新环化,构建成PCV2毒株感染性克隆。