本发明公开了一种可特异性结合猪流行性腹泻病毒的核酸适配体及其用途,属于分子免疫领域。本发明利用SELEX技术,以猪流行性腹泻病毒(PEDV)作为结合抗原从核酸文库中筛选出核酸序列重复率较高的6条核酸适配体,后续通过适配体亲和力测定、适配体特异性检测、平衡解离常数Kd值测定等鉴定出两条结合力最高、特异性良好的核酸适配体,其核心序列分别如SEQ ID No.2和SEQ ID No.3所示。本发明筛选和制备的猪流行性腹泻病毒(PED virus,PEDV)特异性核酸适配体具有极好的特异性和亲和力,为PEDV抗原检测技术的进一步研究提供了重要技术支撑。
本发明提供了一种重组蛋白,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还提供了一种如SEQ ID No.2所示的基因。本发明还提供了一种如上所述的蛋白在检测猪流行性腹泻病毒抗体中的应用,主要是作为包被抗原使用。本发明还提供了一种检测猪流行性腹泻病毒抗体的试剂盒,包括:如上所述的重组蛋白、包被液、洗涤液、封闭液、稀释液、辣根过氧化物酶标记的羊抗猪IgG和底物显色液。本发明以SEQ ID No.1所示的重组蛋白作为包被抗原,采用间接ELISA检测猪流行性腹泻病毒抗体,具有较好的特异性、敏感性及重复性,结果直观准确。