本发明提供一种用于检测HBB基因位点突变的引物及试剂盒，该引物包括PCR扩增引物和测序引物，所述PCR扩增引物的序列如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示，所述测序引物的序列如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示。该试剂盒包括上述的检测HBB基因位点突变的引物、基因组DNA抽提试剂、检测体系PCR反应液和测序体系试剂。本发明的检测引物和试剂盒能够检测超过200种HBB基因的位点突变类型，并且可以发现新的位点突变类型。此外，本发明的检测引物和试剂盒可确定单个β地中海贫血患者携带的HBB基因位点突变。
本发明提供一种乙醛脱氢酶重组基因及其乳酸菌载体和应用，该重组基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，所编码的人源乙醛脱氢酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示，该重组基因的人工合成方法包括：将NCBI数据库获取的ALDH2基因序列进行密码子优化得到ALDH2‑CO(Codon optimized)酶基因；在ALDH2‑CO酶基因的5’端和3’端分别引入限制性内切酶KpnI和EcoNI酶切位点，并依次通过PCR扩增、琼脂糖凝胶电泳和胶回收获得ALDH2目的基因片段；将ALDH2目的基因片段连接至乳酸菌表达载体，转化成乳酸菌细胞。本发明提供了一种新型的重组乙醛脱氢酶基因以及表达该重组基因的乳酸菌，为解酒产品的研发提供了一条新途径和理论基础。
本发明属于生物技术领域，具体涉及一种表达环状RNA的载体及其应用。本发明的环状RNA表达的载体，其脱氧核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。所述环状RNA表达载体具有上游成环序列(SEQ ID NO：2)、下游成环序列(SEQ ID NO：3)和环状RNA编码序列插入酶切位点BamH Ⅰ和Pst Ⅰ。本发明还提供所述环状RNA表达载体的构建方法和所述环状RNA表达载体的应用方法。本发明载体普遍适用于各种环状RNA的表达，表达效率高、稳定，并且能够将任意较长的DNA序列无缝环化成其编码的环状RNA，还可以将目标环状RNA的表达框插入细胞的染色体中，构建稳定细胞株。
