本发明公开了一种葡萄糖酸钙中5种有关物质的检测方法：使用以3～5μm粒径的C18为填料的色谱柱，以含离子对试剂的水溶液为流动相，pH值2～4，流速0.5～2.0ml/min。该方法为高效液相色谱法，配有紫外检测器，同时检测葡萄糖酸钙中的葡萄糖醛酸、葡萄糖醛酸内酯、D‑葡萄糖‑δ内酯、D‑葡萄糖‑γ内酯、5‑羟甲基糠醛的含量，C18填料的色谱柱为CAPCELL PAK AQC18 4.6*250mm，3μm；所述离子对试剂为烷基磺酸钠，可供选择的有戊烷磺酸钠、己烷磺酸钠、庚烷磺酸钠、辛烷磺酸钠、癸烷磺酸钠中的一种或几种，优选地为己烷磺酸钠；所述流动相pH值为2～4，优选的为3.8；流速洗脱程序为：0至6min：0.5～0.8ml/min。该方法首次将难以分离的几种有关物质实现了良好的分离，具有灵敏度高、专属性好、操作简单等优点。
