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[发明专利]一种利用调控细胞周期转录因子提高发酵乙醇产率的方法-CN201910266772.2有效
发明人： 蒋伶活 -专利权人：山东理工大学
申请日： 2019-04-03 - 公布日： 2021-05-04 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用调控细胞周期转录因子提高发酵乙醇产率的方法，属于生物能源技术开发技术领域。本发明通过敲除调控细胞周期的转录因子基因MBP1，SWI4或者SWI6，为提高乙醇发酵的生产效率提供了新的方法，本发明构建的高产乙醇的优良酿酒酵母工程菌株，经过52小时发酵，相比于野生型菌株(WT)，酒精发酵产率，提高了27.3～51.0％。
一种利用调控细胞周期转录因子提高发酵乙醇方法

[发明专利]一种低酒精度的甘蔗汁果酒制备方法-CN202010549416.4在审
发明人： 蒋伶活 -专利权人：山东理工大学
申请日： 2020-06-16 - 公布日： 2020-08-25 - 主分类号： C12G3/025 文献下载
摘要：本发明提供一种低酒精度甘蔗汁果酒的制备方法，包括：1)制备甘蔗汁；2)将葡萄有孢汉逊酵母(Hanseniaspora uvarum)菌液接种到甘蔗汁中混匀后发酵，至发酵液的酒精浓度达到1％时停止发酵；3)去除停止发酵的发酵液中的葡萄汁有孢汉逊酵母细胞，得到甘蔗果酒原浆；4)通过巴斯德灭菌法对甘蔗果酒原液进行灭菌，灌装即得。本发明解决的一个关键技术问题是通过新的酿造方法延长了甘蔗果汁的保鲜时间，获得了一种低酒精度的健康果汁饮料，对提升甘蔗产业的附加值具有巨大的潜力，对保障甘蔗种植户的稳定收益具有重要意义。
一种酒精甘蔗汁果酒制备方法

[发明专利]一种酶活性提高的丙酮酸羧化酶突变体N1078F及其应用-CN201610308734.5有效
发明人：徐国强;蒋伶活;刘洋;李佳雨;刘维瑾 -专利权人：江南大学
申请日： 2016-05-11 - 公布日： 2019-06-21 - 主分类号： C12N9/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种酶活性提高的丙酮酸羧化酶突变体N1078F及其应用，属于遗传工程和发酵工程领域。本发明将米根霉的丙酮酸羧化酶的N1078位点突变成了苯丙氨酸，得到的突变体酶活提高了16.5％。在敲除PDC1和ADH1的基础上敲除基因FUM1，同时过量丙酮酸羧化酶突变体N1078F，发现延胡索酸产量提高了20.5％。该发明有效强化了碳代谢流由丙酮酸进入延胡索酸的合成途径，为构建工程酵母高效生产延胡索酸及其它二元羧酸创造了条件，具有很好的工业应用价值和前景。
一种活性提高丙酮酸羧化酶突变体 n1078f 及其应用

[发明专利]一种产琥珀酸的酿酒酵母基因工程菌及其应用-CN201610333309.1有效
发明人：徐国强;蒋伶活;苏珂;李佳雨;刘维瑾;范欧洋;赵祯 -专利权人：江南大学
申请日： 2016-05-19 - 公布日： 2019-05-10 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明公开了一种产琥珀酸的酿酒酵母基因工程菌及其应用，属于遗传工程和发酵工程领域。本发明用来源于米根霉的苹果酸脱氢酶基因RoMDH替换PDC1，野生型酿酒酵母发酵的乙醇产量达到最大值13.55±1.062g/L，改造菌株MP乙醇产量分别为11.09±0.539g/L，较野生型下降了18.15％。在此基础上，敲除SDH2基因。经培养基优化后，MPΔS缺失株可积累琥珀酸0.698±0.0285g/L，相比之下，野生型酿酒酵母不积累琥珀酸。本发明可以有效减少碳流的损失，为构建工程酵母高效生产琥珀酸创造了条件，具有很好的工业应用价值和前景。
一种琥珀酸酿酒酵母基因工程及其应用

[发明专利]酿酒酵母菌中染色质重塑因子基因在提高发酵酒精产率的应用-CN201910011798.2在审
发明人： 蒋伶活 -专利权人：山东理工大学
申请日： 2019-01-07 - 公布日： 2019-04-23 - 主分类号： C12P7/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种酿酒酵母菌中染色质重塑因子基因在提高发酵酒精产率的应用。染色质重塑因子基因包括SPT10,SWI3,NGG1,UME6和RSC1基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1‑5所示。本发明为提高酒精发酵的生产效率提供了新的方法，为构建高产酒精的优良酿酒酵母工程菌株提供了重要的信息。
染色质重塑因子基因酿酒酵母菌发酵酒精产率酿酒酵母工程菌株核苷酸序列酒精发酵生产效率构建应用酒精高产基因

[发明专利]一种通过过量表达HAC1基因提高酒精生产效率的方法-CN201510713933.X有效
发明人： 蒋伶活;徐国强;吴瑶;杜婕 -专利权人：江南大学
申请日： 2015-10-28 - 公布日： 2018-10-16 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明公开了一种通过过量表达HAC1基因提高酒精生产效率的方法，属于生物能源开发技术领域。本发明是在ace2单基因缺失菌株中过量表达HAC1而获得的工程菌株发酵生产酒精，相比于野生型空载对照菌株，乙醇产量提高了200.8％，酒精对菌体得率提高了138.9％；相比于ace2单基因缺失菌株，乙醇产量提高了13.1％；具有很好的工业应用价值和前景，同时为构建高产酒精的优良酿酒酵母基因工程菌株提供了重要的信息。
一种通过过量表达 hac1 基因提高酒精生产效率方法

[发明专利]一种通过过量表达INO2基因提高酒精生产效率的方法-CN201510714158.X有效
发明人： 蒋伶活;徐国强;吴瑶;杜婕 -专利权人：江南大学
申请日： 2015-10-28 - 公布日： 2018-10-16 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明公开了一种通过过量表达INO2基因提高酒精生产效率的方法，属于生物能源开发技术领域。本发明方法是在ino4单基因缺失菌株中过量表达INO2而获得的工程菌株发酵生产酒精，相比于野生型空载对照菌株，发酵进行到52h，生物量提高了186.6％，酒精产量提高了204.1％，酒精对菌体得率提高了5.6％，具有很好的工业应用价值和前景，同时为构建高产酒精的优良酿酒酵母基因工程菌株提供了重要的信息。
过量表达酒精酒精生产发酵生产酒精基因工程菌株工程菌株工业应用菌体得率酿酒酵母缺失菌株生物能源基因单基因生物量野生型构建菌株空载发酵高产开发

[发明专利]一种提高酒精生产效率的方法-CN201410340315.0有效
发明人： 蒋伶活;徐国强;吴瑶;杜婕 -专利权人：江南大学
申请日： 2014-07-16 - 公布日： 2018-07-06 - 主分类号： C12P7/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种提高酒精生产效率的方法，属于生物能源开发技术领域。本发明应用ACE2单基因缺失的酿酒酵母菌株和/或SWI5单基因缺失的酿酒酵母菌株发酵生产酒精，相比于野生菌，乙醇产量提高了55.9％和86.5％，酒精对菌体得率提高了155.2％和72.5％，具有很好的工业应用价值和前景，同时为构建高产酒精的优良酿酒酵母基因工程菌株提供了重要的信息。
酿酒酵母菌株酒精生产单基因酒精发酵生产酒精基因工程菌株工业应用菌体得率酿酒酵母生物能源野生菌乙醇构建高产应用开发

[发明专利]一种酶活性提高的丙酮酸羧化酶突变体N315F及其应用-CN201510560069.4有效
发明人：徐国强;蒋伶活;吴满珍;李鹏越 -专利权人：江南大学
申请日： 2015-09-06 - 公布日： 2018-02-23 - 主分类号： C12N9/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种酶活性提高的丙酮酸羧化酶突变体N315及其应用，属于遗传工程和发酵工程领域。本发明将米根霉的丙酮酸羧化酶的N315位点突变成了苯丙氨酸，得到的突变体酶活提高了18.6％。在敲除PDC1和ADH1的基础上敲除基因FUM1，同时过量表达丙酮酸羧化酶突变体N315F，发现延胡索酸产量提高了22.0％。同时通过减少装液量，增加溶氧，延胡索酸产量达到318±11.2mg/L，较装液量为100mL/250mL时(253±9.0mg/L)提高了25.7％。该发明有效强化了碳代谢流由丙酮酸进入延胡索酸的合成途径，为构建工程酵母高效生产延胡索酸及其它二元羧酸创造了条件，具有很好的工业应用价值和前景。
一种活性提高丙酮酸羧化酶突变体 n315f 及其应用

[发明专利]一种酶活性提高的丙酮酸羧化酶突变体R485P及其应用-CN201510560217.2有效
发明人：徐国强;蒋伶活;吴满珍;李鹏越 -专利权人：江南大学
申请日： 2015-09-06 - 公布日： 2018-02-23 - 主分类号： C12N9/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种酶活性提高的丙酮酸羧化酶突变体R485P及其应用，属于遗传工程和发酵工程领域。本发明将米根霉的丙酮酸羧化酶的R485位点突变成了脯氨酸，得到的突变体酶活提高了24.8％。在敲除PDC1和ADH1的基础上敲除基因FUM1，同时过量表达丙酮酸羧化酶突变体R485P，发现延胡索酸产量提高了31.1％。同时通过添加32μg/L的生物素，延胡索酸产量达到332±12mg/L，与对照组(290±10.7mg/L)相比提高了16.1％。该发明有效强化了碳代谢流由丙酮酸进入延胡索酸的合成途径，为构建工程酵母高效生产延胡索酸及其它二元羧酸创造了条件，具有很好的工业应用价值和前景。
一种活性提高丙酮酸羧化酶突变体 r485p 及其应用

[发明专利]一种酶活性提高的丙酮酸羧化酶突变体P474N及其应用-CN201510289056.8有效
发明人：徐国强;蒋伶活;吴满珍;李鹏越 -专利权人：江南大学
申请日： 2015-05-29 - 公布日： 2018-01-30 - 主分类号： C12N9/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种酶活性提高的丙酮酸羧化酶突变体P474N及其应用，属于遗传工程和发酵工程领域。本发明将米根霉的丙酮酸羧化酶的P474位点突变成了天冬酰胺，得到的突变体酶活提高了12.8％。在敲除PDC1和ADH1的基础上敲除基因FUM1，同时过量丙酮酸羧化酶突变体P474N，发现延胡索酸产量提高了13.3％。同时通过添加64μg/L的生物素，延胡索酸产量达到357mg/L，较不添加生物素时(256.7±3.0mg/L)提高了37％。该发明有效强化了碳代谢流由丙酮酸进入延胡索酸的合成途径，为构建工程酵母高效生产延胡索酸及其它二元羧酸创造了条件，具有很好的工业应用价值和前景。
一种活性提高丙酮酸羧化酶突变体 p474n 及其应用

[发明专利]一种促进琥珀酸积累的方法-CN201610465898.9在审
发明人：徐国强;蒋伶活;李佳雨;苏珂;刘维瑾;范欧洋;赵祯 -专利权人：江南大学
申请日： 2016-06-24 - 公布日： 2016-11-09 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种促进琥珀酸积累的方法，属于遗传工程和发酵工程领域。本发明以可积累琥珀酸且副产物乙醇减少的菌株MPΔSdh2为出发菌株，通过过量表达源于米根霉的丙酮酸羧化酶基因RoPYC后，可积累琥珀酸0.72±0.02g/L，进一步引入SpMAE1后，琥珀酸产量略有下降，但可积累丙酮酸8.31±0.41g/L，较对照提高了55.04％；在此基础上，而添加最适量的生物素(96μg/L)，菌株MPΔS+pY15TEF1‑RoPYC+pYX212‑SpMAE1可积累琥珀酸2.66±0.03g/L，较不添加生物素时提高了211.70％。本发明为提高琥珀酸积累提供了一个有效的方法，具有很好的工业应用价值和前景。
一种促进琥珀酸积累方法

[发明专利]一种提高延胡索酸产量的方法-CN201610332689.7在审
发明人：徐国强;蒋伶活;刘洋;李佳雨;刘维瑾 -专利权人：江南大学
申请日： 2016-05-19 - 公布日： 2016-07-13 - 主分类号： C12N9/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种提高延胡索酸产量的方法，属于遗传工程和发酵工程领域。本发明将米根霉的丙酮酸羧化酶基因RoPYC进行密码子优化得到基因RoPYC*，然后将RoPYC*的R485位点突变成了脯氨酸。较密码子优化前的野生型丙酮酸羧化酶的表达提高了24.6％，表达突变体的基因工程菌在7L发酵罐条件下，在发酵进行到36h时额外通入10％的二氧化碳，延胡索酸产量达到453.6mg/L，较对照提高了20％。该发明有效强化了碳代谢流由丙酮酸进入延胡索酸的合成途径，为构建工程酵母高效生产延胡索酸及其它二元羧酸创造了条件，具有很好的工业应用价值和前景。
一种提高延胡索产量方法

[发明专利]酿酒酵母基因缺失菌株在清除环境中重金属镍方面的应用-CN201610192250.9在审
发明人： 蒋伶活 -专利权人：江南大学
申请日： 2016-03-30 - 公布日： 2016-07-06 - 主分类号： C12N1/18 文献下载
摘要：本发明涉及酿酒酵母基因缺失菌株在清除环境中重金属镍方面的应用。所述酿酒酵母基因缺失菌株为酿酒酵母基因缺失菌株vps38、酿酒酵母基因缺失菌株vps25和酿酒酵母基因缺失菌株vps30。本发明提供的三株酿酒酵母基因缺失菌株可作为清除环境中重金属镍污染的原始菌株，还可对其进行进一步的基因改造，开发新型具有更高性能的菌株，以有效对重金属镍污染的环境进行治理。
酿酒酵母基因缺失菌株清除环境重金属方面应用

[发明专利]一种高效表达中华绒螯蟹甲壳素的酿酒酵母工程菌-CN201510908042.X在审
发明人：杜婕;蒋伶活 -专利权人：江南大学
申请日： 2015-12-10 - 公布日： 2016-02-03 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明公开了一种高效表达中华绒螯蟹甲壳素的酿酒酵母工程菌，属于生物技术领域。本发明通过将中华绒螯蟹抗脂多糖因子EsCrustin的cDNA克隆至载体质粒pHAC181上，克隆成功的阳性转化子经过测序验证后，再利用同源重组的方法，将目的基因整合于酿酒酵母菌株中GAL1启动子下游，在半乳糖的诱导下，将目的蛋白EsCrustin高效表达。
一种高效表达中华绒螯蟹甲壳素酿酒酵母工程

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