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[发明专利]一种根癌农杆菌介导的黑木相思高效遗传转化体系及其构建方法-CN202310894372.2在审
发明人： 范春节;曾炳山 -专利权人：中国林业科学研究院热带林业研究所
申请日： 2023-07-20 - 公布日： 2023-10-10 - 主分类号： C12N15/84 文献下载
摘要：本发明公开了一种根癌农杆菌介导的黑木相思高效遗传转化体系及其构建方法，以黑木相思优良无性系SR3茎段为外植体，并研制不定芽诱导的培养基，采用含有重组农杆菌的侵染液侵染黑木相思不经过预培养的茎段，然后进行浸染和共培养，将外植体进行转基因株系的诱导和筛选培养，得到黑木相思抗性芽，再筛选得到完成遗传转化的黑木相思阳性植株。其中，通过对实验条件的优化来提高不定芽的诱导率以及获得高效的遗传转化；本发明为本源植物的基因导入和敲除等功能研究提供技术支持，有利于解析黑木相思心材形成、发育等的分子机理，为黑木相思重要基因的功能解析提供参考，且可以在黑木相思优良无性系的基础上进一步获得转基因和基因编辑新品种。
一种根癌农杆菌相思高效遗传转化体系及其构建方法

[发明专利]一种提高尾细桉效益的复层混交方法-CN202210304973.9有效
发明人：李光友;徐建民;范春节;陆海飞;张沛健;陈马兴;李孔生;周芳萍;李娟;李华强 -专利权人：中国林业科学研究院热带林业研究所
申请日： 2022-03-25 - 公布日： 2023-07-04 - 主分类号： A01G23/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种提高尾细桉效益的复层混交方法，针对5年生林龄的尾细桉进行间伐和混交，针对不同种植立地，采取适宜的间伐类型、施肥方式和混交树种选择，而且结合本发明针对尾细桉的追肥和基肥配比、伐根清除、生物菌肥添加，提高了台风或沿海地区尾细桉及其混交林木的抗性、提高了树木胸径和林木单位面积木材蓄积量、提高了大径级高附加值木材产量、促进了混交树种间相互有利共生和立地改善，在延长尾细桉人工林轮伐期的同时促进营养空间的充分利用，丰富林下植被的多样性，改善生态环境和防止病虫害发生，最终提高了林分的经济和生态效益，为台风或沿海地区尾细桉间伐经营和复层混交提供了科学依据和参考。
一种提高尾细桉效益混交方法

[发明专利]一种尾巨桉DH3213的遗传转化方法-CN202310091854.4在审
发明人： 范春节;曾炳山;张昊楠 -专利权人：中国林业科学研究院热带林业研究所
申请日： 2023-02-10 - 公布日： 2023-06-23 - 主分类号： C12N15/84 文献下载
摘要：本发明公开了一种尾巨桉DH3213的遗传转化方法。本发明的根癌农杆菌介导的桉树栽培良种尾巨桉DH3213的高效、快速的不定芽再生和转化方法，解决了现有桉树栽培良种包括尾巨桉DH3213尚未建立遗传转化体系以及桉树遗传转化周期长的问题。本发明突破了桉树栽培良种遗传转化体系的建立，可以直接用于桉树栽培良种DH3213转基因和基因编辑新品种创制；建立的遗传转化体系比其他体系缩短时间1/3‑1/2，可以用于桉树重要性状的基因功能解析；本发明方法周期短，效率高，程序简单，操作方便，结果可靠。
一种尾巨桉 dh3213 遗传转化方法

[发明专利]一种基于发根农杆菌介导的桉树转基因方法-CN202110853447.3在审
发明人： 范春节;徐建民;罗萍;裘珍飞;曾炳山 -专利权人：中国林业科学研究院热带林业研究所
申请日： 2021-07-27 - 公布日： 2021-09-24 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明涉及一种基于发根农杆菌介导的桉树转基因方法，包括以下步骤：S1、无菌桉树增殖芽苗的准备，S2、发根农杆菌的活化和培养，S3、外植体的浸染，S4、共培养，S5、发根诱导和培养，S6、组织化学或荧光检测，S7、PCR检测。有益效果是：利用含35S:GUS报告基因的发根农杆菌Ar1193菌液浸染尾巨桉无菌芽苗，获得根部转化的嵌合体转基因植株，不仅可以大大缩短转化周期，实验结果也比较直观，且能够长期稳定表达；桉树离体毛状根体系为桉树基因功能验证提供了一种快速可靠的方法，同时可以为在根部特异表达的高效营养利用和抗病的转基因桉树新品种的获得奠定基础。
一种基于发根杆菌桉树转基因方法

[发明专利]一种黑木相思难生根无性系组培苗的驯化工艺-CN201911018163.1有效
发明人：裘珍飞;范春节;曾炳山;叶森辉;冯家勇 -专利权人：中国林业科学研究院热带林业研究所
申请日： 2019-10-24 - 公布日： 2021-06-18 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明属于植物驯化移植的技术领域，具体涉及一种黑木相思难生根无性系组培苗的驯化工艺。包括如下步骤：1）培养生根诱导芽苗：选择黑木相思难生根无性系组培苗，采用培养基进行生根诱导，获得生根诱导芽苗；2）种植芽苗：将芽苗种植在海绵支撑的育苗盘中，种植时把海绵块浸湿，底层装纯净水，加盖盖子；3）培养室培养：将育苗盘放置于培养室中，并在培养的中期阶段每天早晚打开盖子通风透气10‑20分钟；4）日光室温培养：将育苗盘转移到日光室温，全日打开育苗盘盖子，并早晚喷雾1次。可大大提高难生根无性系组培苗的移植成活率和生根率，可达到100%，改善苗木质量，缩短苗圃培育时间，节约苗圃管理成本，提高黑木相思组培苗生产效率。
一种相思生根无性系组培苗驯化工艺

[发明专利]一种黑木相思组培苗标准化生产工艺-CN201811523806.3有效
发明人：裘珍飞;曾炳山;范春节;邓文林;陈耀辉 -专利权人：中国林业科学研究院热带林业研究所
申请日： 2018-12-12 - 公布日： 2020-09-25 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：一种黑木相思组培苗标准化生产工艺，包括增殖苗生产和生根苗生产，增殖苗生产内容涉及接种密度、增殖培养时期转接周期和生产苗木时期的转接周期；生根苗生产内容包括接种密度、苗木切割高度、苗木切割程度、生根苗培养时放置时间和炼苗温室放置时间，包括以下步骤：a）获得黑木相思组培苗后，先进行15‑30天的增殖培养，得到增殖苗；b）转移增殖苗进行接种；c）接种的增殖苗培养25‑40天；d）切割增殖苗中高于2.0cm的单芽作为生根苗；e）接种生根苗，f）生根苗培养4‑24天；g）炼苗，时间为6‑26天。本发明标准化生产实现苗木产量的增加，改善苗木质量，提高生产效率，降低生产成本，推动黑木相思优良无性系规模化生产，实现黑木相思无性系林业高效培育。
一种相思组培苗标准化生产工艺

[发明专利]越南奇楠沉香组织培养的方法-CN201510412365.X有效
发明人：李湘阳;曾炳山;裘珍飞;刘英;范春节;徐大平 -专利权人：中国林业科学研究院热带林业研究所
申请日： 2015-07-14 - 公布日： 2017-08-08 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种越南奇楠沉香组织培养的方法。该方法为将消毒后的外植体接种至丛芽诱导培养基中诱导出丛芽；再将丛芽接种到继代增殖培养基继续培养；然后接种至生根培养基中进行生根，生根后进行炼苗和田间栽培管理。本发明方法获得越南奇楠沉香无性系苗木的产率高，时间快，且所获得的苗木健壮，这些苗木一是可以解决种植业越南奇楠沉香苗木缺乏的问题；二是用越楠奇楠沉香的无性系苗进行人工诱导结香，能探索出最好最稳定的人工诱导结香技术，容易得到得香率高而均一、品质优良的沉香，能产生高效的经营效率；三是将推进越南奇楠沉香无性系育种、良种的中试和良种的推广。
越南沉香组织培养方法

[发明专利]南洋楹林优树快繁育苗技术-CN201510566596.6有效
发明人：刘英;曾炳山;范春节;裘珍飞;李湘阳 -专利权人：中国林业科学研究院热带林业研究所
申请日： 2015-09-07 - 公布日： 2017-06-30 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种南洋楹林优树快繁育苗的方法，该方法以林中优树萌芽条为外植体，消毒后接种于丛芽诱导培养基中诱导出丛芽；再将丛芽接种于继代增殖培养基中继代培养；然后再接种于生根培养基中进行生根培养，生根后进行炼苗和田间栽培管理。在本发明中，通过调整大量元素、激素配比及浓度等，提高了增殖苗木质量及组培苗生根率，完善了组培生产工艺流程、降低生产成本，提高生产效率，实现了南洋楹优良无性系产业化、规模化生产。
南洋楹林优树快繁育技术

[发明专利]地被银桦组织培养的方法-CN201510550899.9有效
发明人：李湘阳;曾炳山;裘珍飞;刘英;范春节 -专利权人：中国林业科学研究院热带林业研究所
申请日： 2015-08-31 - 公布日： 2017-06-27 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种地被银桦组织培养的方法。该方法为将消毒后的外植体接种至丛芽诱导培养基中诱导出丛芽；再将丛芽接种到继代增殖培养基继续培养；然后接种至生根培养基中进行生根，生根后进行炼苗和田间栽培管理。本发明方法获得地被银桦无性系苗木的产率高，时间快，且所获得的苗木健壮，这些苗木解决了种植业地被银桦缺乏的问题。
银桦组织培养方法

[发明专利]地被银桦嫁接形成垂枝型银桦的方法-CN201410681743.X有效
发明人：裘珍飞;曾炳山;李湘阳;刘英;范春节 -专利权人：中国林业科学研究院热带林业研究所
申请日： 2014-11-21 - 公布日： 2016-10-19 - 主分类号： A01G1/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种地被银桦嫁接形成垂枝型银桦的方法。该方法为选取乔木银桦实生苗作为砧木，在高50～150cm处截杆作为嫁接口；将长为20cm～30cm被银桦枝条剪成5cm～7cm长的接穗，含一个节，保留腋芽；采用劈接法进行嫁接即可。地被银桦耐干旱、耐修剪，花漂亮，花期长，但不耐湿，难以在我国华南地区大量推广种植。本发明首次将引进的地被银桦嫁接到具有广泛适应性的乔木银桦上，并通过控制嫁接高度，形成风格迥异的垂直型银桦，它适合我国坡地、园林绿化和石山造林，大大丰富了我国南方的护坡、荒山、石山造林树种，也为园林绿化提供了新、奇、特的景观树种。
银桦嫁接形成垂枝型方法

[发明专利]尾细桉叶片诱导的植株再生体系建立方法-CN201610249359.1在审
发明人： 范春节;曾炳山;裘珍飞 -专利权人：中国林业科学研究院热带林业研究所
申请日： 2016-04-21 - 公布日： 2016-08-03 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：尾细桉叶片诱导的植株再生体系建立方法，包括如下步骤：选取在增殖培养基中生长旺盛的1.5‑2.0cm的芽，放置在生根培养基上生根培养20‑30天，取无菌生根苗的叶片放置在再生诱导培养基中30~40d，将诱导的不定芽转移到不定芽伸长培养基中进行芽伸长培养，15‑20天转接一次，并选择1.5‑2.0cm的不定芽转接到生根培养基中生根诱导。本发明通过优化激素、大量元素及外植体状态等条件，以期建立稳定的、高效的尾细桉叶片再生体系，为尾细桉的细胞育种、基因工程等研究奠定技术基础，该方法不定芽诱导率高，壮苗效果好，生根率高。
尾细桉叶片诱导植株再生体系建立方法

[发明专利]热带木本植物组织培养工厂化育苗中细菌污染的处理方法-CN201610169465.9在审
发明人： 范春节;曾炳山;裘珍飞 -专利权人：中国林业科学研究院热带林业研究所
申请日： 2016-03-23 - 公布日： 2016-08-03 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：热带木本植物组织培养工厂化育苗中细菌污染的处理方法，包括如下步骤：选择抗生素，过滤灭菌后加入到增殖培养基中配制培养基；在培养基中培养热带木本植物的增殖苗，植株生长状态相对良好，挑选可见细菌菌落相对较少的增殖苗进行试验；在超净工作台中，使用消毒好的尖头镊子夹取1‑2cm的植株茎尖，然后转移到添加抗生素的增殖培养基中；按周期对热带木本植物的增殖苗进行多次继代培养。本发明解决工厂化育苗中难以避免的由于人工操作引起的细菌污染，短期内解除植物细菌污染的干扰，重新获得无菌的优良苗木，满足市场需求，为植物组织培养特别是热带木本植物的工厂化育苗提供技术支持，为珍贵材料的保存方法和方式提供新的途径和技术方法。
热带木本植物组织培养工厂育苗细菌污染处理方法

[发明专利]米老排的组织培养方法-CN201310047746.3有效
发明人：裘珍飞;曾炳山;范春节;李湘阳;刘英;尹光天 -专利权人：中国林业科学研究院热带林业研究所
申请日： 2013-02-06 - 公布日： 2013-06-05 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明公开了米老排的组织培养方法，通过选取优树萌条，建立组织培养无性繁殖体系，在短期内培育出大量优质苗木，实现规模化提供优质无性系米老排苗木的目的，以满足市场的需求，这不仅大大缩短了米老排的育种年限，同时为进一步利用基因工程方法开展遗传改良提供了理论和技术依据。
米老排组织培养方法

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