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[发明专利]基因编辑构建体及其应用-CN202310645338.1在审
发明人：梁德生;胡志青;唐齐玉;邬玲仟 -专利权人：上海苹谱医疗科技有限公司
申请日： 2023-06-01 - 公布日： 2023-08-22 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本公开提供一种基因编辑构建体及其应用，所述基因编辑构建体用于将外源基因定点整合入基因组的核糖体DNA(rDNA)区，并能高效地表达其携带的外源基因。
基因编辑构建及其应用

[发明专利]质粒、干细胞及应用-CN202110533654.0有效
发明人：梁德生;王祖佳;周妙金;胡志青;邬玲仟 -专利权人：上海苹谱医疗科技有限公司
申请日： 2021-05-17 - 公布日： 2023-05-12 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明涉及一种TALEN/TALENickase介导的非病毒基因打靶质粒，N端融合异亮氨酸拉链的TRAIL表达框整合的iPSCs干细胞及其应用。所述质粒的序列如SEQ ID NO.1所示，所述质粒与基因编辑工具TALEN联合可实现治疗基因TRAIL的定点整合，规避病毒载体随机整合带来的风险，确保治疗基因表达的持续性和高水平。本发明以定点整合TRAIL的iPSCs作为MSCs的来源，克服了组织来源的MSCs的局限性，可源源不断获得，具有适用性和经济价值。TRAIL‑iMSCs可持续性表达TRAIL，对多种肿瘤细胞都具有诱导凋亡的效果，表现出抗肿瘤的应用潜力。
质粒干细胞应用

[发明专利]一种诊断脊髓性肌萎缩症的CRISPR-Cas系统及其应用-CN202010666741.9有效
发明人：梁德生;胡志青;周妙金;邬玲仟 -专利权人：上海苹谱医疗科技有限公司
申请日： 2020-07-13 - 公布日： 2023-04-11 - 主分类号： C12Q1/6883 文献下载
摘要：本发明涉及一种CRISPR‑Cas系统，特别是一种诊断脊髓性肌萎缩症的CRISPR‑Cas系统及其应用。本发明的诊断脊髓性肌萎缩症的CRISPR‑Cas系统，包括Cas14a1、crRNA、ssDNA和FQ‑probe。本发明构建的基于CRISPR/Cas14a1与不对称PCR结合的方法可进行SMA患者基因检测，可用于特异性检测SMN1基因的突变情况，且与现有CRISPR/Cas12a诊断SMA技术不同之处在于，本发明还能区别开SMN2基因干扰，从而判断被检测者是否患脊髓性肌萎缩症，且具有操作简便、特异性高、低成本的特点。
一种诊断脊髓萎缩 crispr cas 系统及其应用

[发明专利]基于CRISPR增加SMN蛋白表达的方法及其应用-CN202110638830.7有效
发明人：梁德生;周妙金;胡志青;邬玲仟 -专利权人：上海苹谱医疗科技有限公司
申请日： 2021-06-08 - 公布日： 2023-03-31 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明涉及一种基于CRISPR增加SMN蛋白表达的方法，包括：构建特异性编辑TSL2位点的CRISPR基因编辑系统，该系统包括靶向TSL2位点的sgRNA和Cas9蛋白，或者是表达出靶向TSL2位点的特定sgRNA和Cas9蛋白的质粒或病毒载体；后将系统导入细胞内或小鼠体内，对SMN2基因7号外显子上的TSL2位点进行编辑，使其随机产生插入或缺失或插入和缺失，从而使TSL2结构破坏或不稳定，进而增加全长SMN的mRNA与蛋白表达。利用基因编辑技术精确编辑SMN2基因TSL2位点，编辑后的细胞能持续转录、翻译，蛋白增加的阳性克隆率达44％。
基于 crispr 增加 smn 蛋白表达方法及其应用

[发明专利]基于PE增加SMN蛋白表达的方法及其应用-CN202110533655.5在审
发明人：梁德生;周妙金;胡志青;邬玲仟 -专利权人：上海苹谱医疗科技有限公司
申请日： 2021-05-17 - 公布日： 2022-11-22 - 主分类号： C07K14/47 文献下载
摘要：本发明涉及一种基于PE增加SMN蛋白表达的方法及其应用。所述基于PE增加SMN蛋白表达的方法包括构建的精确缺失ISS‑N1核心序列9个碱基的PE基因编辑系统，该系统包括靶向ISS‑N1位点的pegRNA、Nick‑sgRNA和PE蛋白，或者是表达出靶向ISS‑N1位点的pegRNA、Nick‑sgRNA和PE蛋白的质粒；后将系统导入细胞，对细胞进行基因编辑，使SMN2基因ISS‑N1核心序列精准缺失9个碱基，来增加全长SMN的mRNA与蛋白表达。本发明显著增加SMN蛋白的表达水平，建立了精确、高效且基因组变化小的SMA原位基因治疗技术。
基于 pe 增加 smn 蛋白表达方法及其应用

[发明专利]一种人诱导多潜能干细胞、构建方法及其用途-CN202210242445.5在审
发明人：梁德生;胡志青;周妙金;邬玲仟 -专利权人：上海苹谱医疗科技有限公司
申请日： 2019-05-16 - 公布日： 2022-07-05 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明涉及一种多潜能干细胞，能定向分化为内皮祖细胞。本发明还涉及该多潜能干细胞的构建方法，及其在制药上的用途。本发明要求保护的基本技术方案是：一种人诱导多潜能干细胞，其特征在于F8基因B区编码序列中突变位点附近被框内缺失，或者整个B区编码序列被靶向缺失。本发明克服F8基因表达异常的方法，是提供一种修饰过的人诱导多潜能干细胞，其中非正常表达的F8基因B区编码序列中的突变位点附近序列被框内缺失或整个B区编码序列被靶向缺失。该人诱导多潜能干细胞的获得方法中，不需要构建供体载体，只需要直接合成ssODN即可，技术上实现相对容易，不会添加任何筛选基因，且效率较高。
一种诱导潜能干细胞构建方法及其用途

[发明专利]一种人诱导多潜能干细胞、构建方法及其用途-CN201910408744.X有效
发明人：梁德生;胡志青;周妙金;邬玲仟 -专利权人：上海苹谱医疗科技有限公司
申请日： 2019-05-16 - 公布日： 2022-05-13 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明涉及一种多潜能干细胞（iPSCs），能定向分化为内皮祖细胞。本发明还涉及该多潜能干细胞的构建方法，及其在制药上的用途。本发明要求保护的基本技术方案是：一种人诱导多潜能干细胞，其特征在于F8基因B区编码序列中突变位点附近被框内缺失，或者整个B区编码序列被靶向缺失。本发明克服F8基因表达异常的方法，是提供一种修饰过的人诱导多潜能干细胞，其中非正常表达的F8基因B区编码序列中的突变位点附近序列被框内缺失或整个B区编码序列被靶向缺失。该人诱导多潜能干细胞的获得方法中，不需要构建供体载体，只需要直接合成ssODN即可，技术上实现相对容易，不会添加任何筛选基因，且效率较高。
一种诱导潜能干细胞构建方法及其用途

[发明专利]一种重组载体及其制备方法和应用-CN202110953746.4在审
发明人：梁德生;赵俊雅;胡志青;邬玲仟 -专利权人：中南大学
申请日： 2021-08-19 - 公布日： 2021-12-03 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明提供一种治疗A型血友病的重组载体、诱导性多能干细胞及其制备方法。本发明使用非病毒载体对诱导性多能干细胞进行基因打靶，将血小板特异性启动子启动的F8表达框靶入诱导性多能干细胞中。避免了使用病毒元件可能存在的随机插入和免疫原性的风险。诱导性多能干细胞可定向分化形成造血祖细胞，所得造血祖细胞的转录水平F8基因表达量和FⅧ蛋白表达量均明显高于正常人细胞的转录水平F8基因表达量和FⅧ蛋白表达量。
一种重组载体及其制备方法应用

[发明专利]特异性示踪内皮细胞分化的hESC指示细胞系的构建方法-CN201710894222.6有效
发明人：梁德生;胡志青;邬玲仟 -专利权人：中南大学
申请日： 2017-09-28 - 公布日： 2020-11-06 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种特异性示踪内皮细胞分化的hESC指示细胞系的构建方法，该方法包括如下步骤：(1)构建质粒CD144N‑GFP；(2)构建质粒TALENs，所述质粒TALENs包括质粒CD144N‑L2和质粒CD144N‑R2；(3)将质粒CD144N‑GFP和质粒TALENs同时核转ESCs，经过G418筛选，挑取单克隆之后，利用跨5’同源臂引物F1/R1及跨3’同源臂引物F2/R2进行PCR初步鉴定，鉴定双侧阳性者进行Southern blot鉴定，利用Kpn I酶切，长同源臂上探针进行杂交鉴定，阳性者即为特异性示踪内皮细胞分化的hESC指示细胞系。
特异性内皮细胞分化 hesc 指示细胞系构建方法

[发明专利]触控输入装置及含有触控输入装置的电子系统-CN200810171234.7无效
发明人：叶志宪;胡志青;刘振宇 -专利权人：伦飞电脑实业股份有限公司
申请日： 2008-10-27 - 公布日： 2009-05-06 - 主分类号： G06F3/041 文献下载
摘要：本发明有关一种触控输入装置及含有触控输入装置的电子系统。该触控输入装置包含一触控单元，包括具多个下导电薄膜区块的基板、邻近基板由挠曲材质制成触压板，显示于基板与触压板之一的预定图案，及设于基板与触压板间的绝缘间隔物，触压板具有多个对应该等下导电薄膜区块的上导电薄膜区块，当触压板被触压并变形后，至少一个对应的上、下导电薄膜区块间会电导通并输出一导通信号。该电子系统，包含触控输入装置，及与触控输入装置电连接的显示器。当使用者触压显示有预定图案的触压板，且一次让一个或多个上导电薄膜区块变形时，本发明利用多个对应下导电薄膜区块，可同时输出上下导电薄膜区块的导通信号，能够达到同时触控输入多个信号的功效，提升产品特性。
输入装置含有电子系统

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