本发明提供了一种RAA‑LFD检测停乳链球菌的引物对和探针组合及其应用，属于致病菌检测技术领域。本发明检测停乳链球菌的引物对和探针中，上游引物序列如SEQ ID NO：1～3所示，下游引物序列如SEQ ID NO：4～5所示，探针序列如SEQ ID NO：6所示；利用本发明引物对和探针的组合，可实现对停乳链球菌的准确检测，且上述引物对和探针组合对停乳链球菌的最低检测限为1.002×102pg/μL，并且具有检测时间短、反应温度易达到、特异性强、灵敏度高和检测结果符合率高等优点，对设备及人员操作技术要求低，便于在缺乏实验室检测设备的场景下开展停乳链球菌的检测。
本发明公开了一种用于检测鱼类鳃结节病病原菌的双重PCR引物、试剂盒及检测方法，引物包括引物对1和引物对2，其序列如SEQ ID NO.1‑4所示。检测方法包括：提取待测样本基因组DNA，以基因组DNA为模板，采用上述双重PCR引物进行PCR扩增，并对扩增产物进行电泳检测，若在263bp处及593bp处出现电泳条带，则说明待测样本感染鳃结节病病原菌。本发明提供的利用双重PCR检测方法对诺卡氏菌病感染的鱼体样本鳃组织DNA进行检测，能够快速准确地发现鰤诺卡氏菌病原，灵敏度高，特异性和重复性好。
