本发明公开了一种检测UGT1A1基因双位点多态性的引物和探针,包括检测UGT1A1*28和UGT1A1*6基因多态性的引物和探针;检测UGT1A1*28基因多态性的引物序列如SEQ ID No.1‑2所示,探针序列如SEQ ID No.3‑4所示,检测UGT1A1*6基因多态性的引物序列如SEQ ID No.5‑6所示,探针序列如SEQ ID No.7‑8所示。与Sanger测序等方法比较,采用本发明的引物和探针来检测UGT1A1基因双位点多态性,整个检测DNA用量少,并且检测速度快,且操作简单,对操作人员要求低,除石蜡样品以外,还能够检测外周血标本及口腔粘膜等样本,具有应用范围广的优势。