本发明公开ALS突变蛋白,其ALS1氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示,ALS3氨基酸序列如SEQ ID No:4所示。本发明还公开编码该突变蛋白的核酸,含有该核酸的表达盒、重组载体或细胞。本发明还公开该突变蛋白、核酸、表达盒、重组载体或细胞在植物抗除草剂方面的应用。本发明还公开了获得具有除草剂抗性植物的方法以及抗性植物鉴定方法。本发明是在我国油菜中首次发现的双基因双突变位点的ALS抑制剂类除草剂乙酰乳酸合酶突变体;在田间喷施ALS抑制剂类除草剂苯磺隆和甲基二磺隆实验结果表明,含有本发明的ALS突变蛋白的油菜DS3在3‑4叶期施用16倍的杂草防治推荐使用浓度后,植株仍然正常生长发育和结实。
本发明公开了检测甘蓝型油菜抗磺酰脲类除草剂基因BnALS3R的引物与应用,属于分子育种领域。引物SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2用于检测甘蓝型油菜抗磺酰脲类除草剂基因BnALS3R的方法为:以甘蓝型油菜总DNA作为模板,加入引物进行PCR扩增;PCR产物进行限制性核酸内切酶BsrDI消化;酶切产物用来区分含抗性基因BnALS3R的纯合型油菜、含抗性基因BnALS3R的杂合型油菜和不含抗性基因BnALS3R的纯合型油菜。本发明能快速、准确地检测油菜植株是否含有抗性基因BnALS3R,更精确检测所含除草剂基因是纯合型还是杂合型,从而快速有效地实现培育抗除草剂油菜新品种的育种目标。