本发明公开了一种用于检测日勾维多细菌源菌的引物组及其应用。所述引物组核酸序列包括:SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8、SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.9所示序列中的任意一组或至少两组的组合。本发明以日勾维多细菌源菌的看家基因为目标基因,设计了特异性引物,优化了反应条件和扩增程序,建立了双重PCR快速检测方法,可快速地检出样品中的日勾维多细菌源菌。