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[发明专利]一种单链核酸分子高通量测序文库的构建方法及其应用-CN202010949803.7有效
发明人：张腾龙;杨春燕;梁占超;商宇红;师雅宁;段小红;王东亮 -专利权人： 杭州求臻医学检验实验室有限公司
申请日： 2020-09-10 - 公布日： 2023-09-12 - 主分类号： C40B50/06 文献下载
摘要：本发明涉及生物测序领域，特别涉及一种单链核酸分子高通量测序文库的构建方法及其应用；包括以下步骤：从样品细胞中获取单链核酸；采用片段化试剂对长链的单链核酸样本片段化；在片段化单链核酸的3'末端加上基团A；加入5'端被基团B修饰且含有UMI分子标签的单链接头和盐离子缓冲液，在室温条件下，3'修饰基团A的片段化单链核酸与5'端修饰基团B单链接头发生加成反应且连接在一起；加入单向延伸引物1、单向延伸引物2和单链延伸试剂，用于由单链核酸变成双链核酸；加入测序引物和PCR混合液进行扩增，扩增产物即为测序文库。本发明的方法不仅适用于RNA样品，还适用于ssDNA，操作步骤简单，具有时间短、成本低、效率高的优势。
一种核酸分子通量序文构建方法及其应用

[发明专利]用于食管癌早期筛查的生物标志物组合、试剂盒及应用-CN202111452254.3在审
发明人：张怡然;张腾龙;杨春燕;段小红;马云;王东亮 -专利权人： 杭州求臻医学检验实验室有限公司
申请日： 2021-12-01 - 公布日： 2022-02-01 - 主分类号： C12Q1/6886 文献下载
摘要：本发明涉及分子生物技术领域，特别涉及用于食管癌早期筛查的生物标志物组合、试剂盒及应用，生物标志物组合包括与食管癌人群早期甲基化位点相关的4对靶标特异引物、4个特异性引物探针及对应的内参引物、内参引物探针。与现有技术相比，本发明通过筛选中国人群食管癌早期基因组超甲基化区域，针对这些区域选择含有CCGC,CCGG,GCGC,ACGT,GCGG中至少两个位点的区间作为靶点设计若干对PCR引物，最终筛选出4对可以在甲基化敏感内切酶的辅助下可以区分肿瘤组织与正常组织的PCR效率高，特异性强，稳定性好的引物及对应探针序列，提高食道癌早癌检出率、改善食道癌治疗效果、降低食道癌死亡率。
用于食管癌早期生物标志组合试剂盒应用

[发明专利]一种乳腺癌筛查标志组合物及其选取方法、乳腺癌筛查试剂盒-CN202111373263.3在审
发明人：张怡然;段小红;杨春燕;宋莹莹;王冰;王东亮 -专利权人： 杭州求臻医学检验实验室有限公司
申请日： 2021-11-18 - 公布日： 2022-01-28 - 主分类号： C12Q1/6886 文献下载
摘要：本申请提供一种乳腺癌筛查标志组合物及其选取方法、乳腺癌筛查试剂盒，涉及体外诊断技术领域，本发明技术方案的乳腺癌筛查标志组合物在乳腺癌中高甲基化，白细胞中低甲基化，且具有甲基化敏感内切酶酶切位点，利用甲基化敏感内切酶不能切割甲基化位点的特性，降解非肿瘤来源cfDNA，特异扩增肿瘤来源ctDNA，极大提升检查灵敏度，并且该标志组合物数量较少，操作简单，耗时短。通过更精准有效的检测排查乳腺癌，进而降低乳腺癌的死亡率，减少乳腺癌对女性的伤害。
一种乳腺癌标志组合及其选取方法试剂盒

[发明专利]用于胃部肿瘤筛查的生物标志物组合、试剂盒及应用-CN202111434922.X在审
发明人：杨春燕;张怡然;王冰;王昊昊;王东亮;周启明 -专利权人： 杭州求臻医学检验实验室有限公司
申请日： 2021-11-29 - 公布日： 2022-01-18 - 主分类号： C12Q1/6886 文献下载
摘要：本发明涉及分子生物技术领域，特别涉及用于胃部肿瘤筛查的生物标志物组合、试剂盒及应用，用于胃部肿瘤筛查的生物标志物组合包括与膀胱癌人群早期甲基化位点相关的3对靶标特异引物、3个特异性引物探针及对应的内参引物、内参引物探针。与现有技术相比，本发明最终筛选出3对可以在甲基化敏感内切酶的辅助下对HOXB13基因甲基化水平进行判定的PCR效率高，特异性强，稳定性好的引物及对应探针序列，检测简单易行、判读客观，避免了人为判读结果的主观性，提高了准确率；可以区分胃癌患者与健康人群，用于肿瘤的早期筛查、早期诊断、疗效评价和追踪以及预后评估。
用于胃部肿瘤生物标志组合试剂盒应用

[实用新型]一种用于二代测序卵巢癌基因靶向捕获试剂盒-CN202020957186.0有效
发明人：段小红;杨春燕;陈瑞芳;张腾龙;梁占超;王东亮 -专利权人： 杭州求臻医学检验实验室有限公司
申请日： 2020-05-31 - 公布日： 2021-06-01 - 主分类号： C12M1/34 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种用于二代测序卵巢癌基因靶向捕获试剂盒，包括捕获盒主体、外壳、提把、锁扣和固定杆，捕获盒主体的外侧固定连接有外壳，捕获盒主体的顶部固定连接有盒盖，捕获盒主体的底部固定连接有固定杆，捕获盒主体的内部顶部固定连接有固定板，捕获盒主体的正前方中间部位固定连接有锁扣，锁扣大大的提高了捕获盒主体的实用效果，体现了该装置的实用性，震动弹簧大大的提高了捕获盒主体的稳定效果和提高了试剂管的的混合速率，体现了该装置的高效性，密封条大大的提高了捕获盒主体的密封效果，体现了该装置的密封性，泡沫塑料大大的提高了捕获盒主体的稳定效果，体现了该装置的稳定性，在未来具有广泛的发展前景。
一种用于二代卵巢癌基因靶向捕获试剂盒

[发明专利]快速检测ALK基因融合突变的引物对、探针、试剂盒及其使用方法-CN202011538800.0在审
发明人：段小红;杨春燕;张腾龙;高亚军;商宇红;周启明 -专利权人： 杭州求臻医学检验实验室有限公司
申请日： 2020-12-23 - 公布日： 2021-04-09 - 主分类号： C12Q1/6886 文献下载
摘要：本发明涉及数字PCR技术领域，尤其是指快速检测ALK基因融合突变的引物对、探针、试剂盒及其使用方法，所述引物对和探针根据待测靶标区域设计：所述待测靶标区域的筛选来自ALK基因mRNA断裂位置之前的5'端和之后的3'端的至少二个相邻外显子区域；所述待测靶标区域不含有SNP位点、无重复序列和GC含量为40‑60％；所述引物对和探针地长度范围为10‑30bp，更优选地为15‑25bp，使引物Tm值为40‑70℃，探针Tm值达到60‑75℃。本发明能够准确发现导致ALK基因转录异常的基因融合，而且实验操作简单，检测周期短，性价比高。
快速检测 alk 基因融合突变引物探针试剂盒及其使用方法

[发明专利]快速检测ROS1基因融合突变的引物对、探针、试剂盒及其使用方法-CN202011587669.7在审
发明人：段小红;杨春燕;张腾龙;赵梓君;承康平;周启明 -专利权人： 杭州求臻医学检验实验室有限公司
申请日： 2020-12-29 - 公布日： 2021-03-26 - 主分类号： C12Q1/6886 文献下载
摘要：本发明涉及数字PCR技术领域，尤其是指快速检测ROS1基因融合突变的引物对、探针、试剂盒及其使用方法，包括用于检测ROS1基因融合突变的引物对和探针，所述引物对和探针根据待测靶标区域设计；根据上述引物对和探针提供一种快速检测ROS1基因融合突变的试剂盒，试剂盒包括上述的引物对和探针；所述引物对、探针或试剂盒地使用方法，该方法包括以下步骤：S1，提取获得肿瘤组织RNA样本；S2，使用上述引物对、探针或试剂盒对RNA样本进行数字PCR反应；S3，判读样本是否发生ROS1基因融合突变。本发明的方法不受融合伴侣和融合位点影响，能够准确发现导致ROS1基因转录异常的基因融合，同时检测已知和未知融合变异，避免假阴性，实验操作简单，检测周期短，性价比高。
快速检测 ros1 基因融合突变引物探针试剂盒及其使用方法

[发明专利]一种基于数字PCR技术检测ERBB2基因扩增的方法及其检测试剂盒-CN202011551119.X在审
发明人：段小红;杨春燕;陈瑞芳;张亮;张腾龙;周启明 -专利权人： 杭州求臻医学检验实验室有限公司
申请日： 2020-12-23 - 公布日： 2021-03-26 - 主分类号： C12Q1/6886 文献下载
摘要：本发明属于分子诊断技术领域，特别是涉及一种基于数字PCR技术检测ERBB2基因扩增的方法及其检测试剂盒，所述试剂盒包括引物探针预混液，所述预混液中包括：检测ERBB2基因的上下游引物、检测ERBB2基因的荧光探针、检测人ATCB内参基因的上下游引物、检测人ATCB内参基因的荧光探针；所述方法包括以下步骤：S1、提供被测者的检测样本，所述的检测样本为血浆样本；S2、从S1中血浆样本中，提取待测样本的ctDNA；S3、使用数字PCR平台对S2中提取样本进行扩增反应；S4、对扩增结果进行分析与判读；本发明提供的ERBB2基因扩增检测方法，是基于微液滴数字PCR检测系统，减少人为操作干扰，结果稳定，准确度高，数据扩增效果好，能够更便捷的用于辅助诊断与临床治疗指导。
一种基于数字 pcr 技术检测 erbb2 基因扩增方法及其试剂盒

[发明专利]一种检测人MET基因扩增的引物组合物、试剂和试剂盒及其应用-CN202011587610.8在审
发明人：段小红;杨春燕;王冬冬;丁蕊;张腾龙;周启明 -专利权人： 杭州求臻医学检验实验室有限公司
申请日： 2020-12-29 - 公布日： 2021-03-12 - 主分类号： C12Q1/6886 文献下载
摘要：本发明涉及人MET基因检测技术领域，尤其是指一种检测人MET基因扩增的引物组合物、试剂和试剂盒及其应用，其应用为一种检测人MET基因扩增的方法，包括以下步骤：S1，提取受试者全血样本中的cfDNA；S2，以步骤S1中提取的cfDNA为模板，将待测样品cfDNA模板、用于检测人MET基因扩增的引物组合物、探针或试剂盒进行定量数字PCR反应，制备ddPCR混合液；S3，对步骤S2中PCR扩增反应后的产物进行信号收集；S4，根据步骤S3中收集的荧光信号类型判断待测样品中是否含有MET基因扩增。本发明敏感性高、准确性高、解读方便且易开展。
一种检测 met 基因扩增引物组合试剂试剂盒及其应用

[实用新型]一种新型数字PCR仪的保存装置-CN202020984520.1有效
发明人：师雅宁;杨春燕;张腾龙;杨文娟;王天阳;孙大伟 -专利权人： 杭州求臻医学检验实验室有限公司
申请日： 2020-06-02 - 公布日： 2021-02-26 - 主分类号： B65D81/05 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种新型数字PCR仪的保存装置，包括保存装置主体、箱体、箱盖和控制器，保存装置主体的底部固定连接有箱体，箱体的顶部活动连接有箱盖，箱体的另一侧底部活动连接有按钮，箱体的内部底部固定连接有控制器，控制器的顶部固定连接有伸缩柱，伸缩柱的顶部固定连接有放置板，放置板升到箱体顶部时，使用者就可以将拼接块向两端进行抽出，使用者就可以将数字PCR仪进行拿取，从而也使使用者将数字PCR仪时不需要将手插入拿取的就可以进行拿取，同时当在没有地方放置的情况下，也可以将拼接块全部拿出将数字PCR仪放置在放置板进行操作，从而使保存装置形成一个可以伸缩的工作台方便使用者将数字PCR仪进行放置，未来具有广泛的发展前景。
一种新型数字 pcr 保存装置

[实用新型]一种超低温冰箱温度控制装置-CN202020955091.5有效
发明人：丁蕊;师雅宁;段小红;杨春燕;孙大伟;王天阳 -专利权人： 杭州求臻医学检验实验室有限公司
申请日： 2020-05-30 - 公布日： 2020-12-29 - 主分类号： F25D11/00 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种超低温冰箱温度控制装置，包括冰箱主体、耐热电源线、支撑腿和制冷构件，冰箱主体的底端固定连接有支撑腿，冰箱主体的底部内部另一侧固定连接有制冷构件，冰箱主体的后面底部固定连接有耐热电源线，冰箱主体的中间内部顶端固定连接有温度传感器，冰箱主体的前面顶部中间位置固定连接有控制机构，控制机构可以将冰箱主体内储物仓的温度进行实时监控，并在外部电路断电的情况下能进行自行供电运作，将冰箱主体内部的温度进行检测，并在冰箱主体内部的储物仓温度低于设定的温度时，会发出警报声，且指示灯亮起，在外部电路连通的时候，单片机就会为蓄电池补充电能，供下次使用，有效的提高了装置使用的实用性。
一种超低温冰箱温度控制装置

[实用新型]一种数字PCR微液滴的发生装置-CN201921611960.6有效
发明人：段小红;王东亮;承康平;张腾龙 -专利权人： 杭州求臻医学检验实验室有限公司
申请日： 2019-09-26 - 公布日： 2020-09-18 - 主分类号： C12M1/38 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种数字PCR微液滴的发生装置，包括装置主体、支撑腿、开关和触控屏，装置主体的前面底部中间位置嵌入连接有开关，装置主体的前面中间顶部位置嵌入连接有触控屏，装置主体的顶端固定连接有反应容器，反应容器的中间位置嵌入连接有观察窗，反应容器顶端固定连接有顶盖，顶盖的顶部一侧嵌入连接有通孔，装置主体的底端固定连接有支撑腿，支撑腿的底端嵌入连接有橡胶垫，在使用装置之前，需要将装置搬运到相应的位置，并通过支撑腿对装置进行支撑固定，橡胶垫的底端设置有粗糙的纹路，能增大支撑腿与固定地面接触的摩擦力，为支撑腿提供足够的抓地力，且橡胶垫柔软的性质，能达到减震的效果，有效的提高了支撑腿固定支撑的稳定性。
一种数字 pcr 微液滴发生装置

[实用新型]一种大面积数字PCR微滴荧光高通量检测装置-CN201921617689.7有效
发明人：张腾龙;段小红;杨春燕;王东亮 -专利权人： 杭州求臻医学检验实验室有限公司
申请日： 2019-09-26 - 公布日： 2020-09-18 - 主分类号： C12M1/00 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种大面积数字PCR微滴荧光高通量检测装置，包括装置主体、开关、显示屏和电源线，装置主体的前面顶部一侧嵌入连接有开关，装置主体的前面顶部中间位置嵌入连接有显示屏，装置主体的前面底部位置镶嵌连接有控制面板，装置主体的后面底部另一侧部位固定连接有电源线，装置主体的后面内侧底部部位固定连接有试验台，装置主体的后面内侧顶部部位固定连接有检测部件，检测部件设置在装置主体的后面内侧顶部，检测部件与装置主体固定连接，检测部件能将进行大面积数字PCR微滴荧光高通量检测，且在进行操作的时候，可以通过物镜的连接螺纹将物镜进行更换与拆卸，在不使用工具的情况下就能进行操作，有效的提高了装置安装与拆卸的便利性。
一种大面积数字 pcr 荧光通量检测装置

[实用新型]一种微型数字PCR成像仪-CN201921611957.4有效
发明人：承康平;段小红;张腾龙;王东亮 -专利权人： 杭州求臻医学检验实验室有限公司
申请日： 2019-09-26 - 公布日： 2020-07-07 - 主分类号： C12M1/34 文献下载
摘要：本实用新型公开一种微型数字PCR成像仪，包括成像仪装置主体、主接座、成像台和成像仪，成像仪装置主体的底部固定连接有主接座，主接座的正面中间嵌入连接有显示器，主接座的顶端前面固定连接有承物台，主接座的顶端后面另一侧嵌入连接有成像台拼接槽，主接座的顶端后面搭接相连有成像台，成像台的正面顶部中间嵌入连接有成像仪，成像仪，极大程度提高了成像仪装置主体本身的实用程度，具有多种使用方式供使用者使用，体现了本实用新型的多样性，升降柱，可便于微型成像仪对数据更好的记录，提高成像质量，且便于使用者调节使用，成像仪拼接槽，便于使用者对成像仪的快速安装与拆卸工作，在未来具有广泛的使用前景。
一种微型数字 pcr 成像

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