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[发明专利]基于核酸外切酶Ⅲ的荧光分析法检测黄曲霉毒素的方法-CN202211019155.0在审
发明人： 朱颖越;陈静怡;李瀚阳;李欣怡;周旋;储呈娴;王悦蔓;潘妙婷 -专利权人：常熟理工学院
申请日： 2022-08-24 - 公布日： 2023-04-14 - 主分类号： C12Q1/686 文献下载
摘要：本发明公开了基于核酸外切酶Ⅲ的荧光分析法检测黄曲霉毒素的方法，包括步骤：(1)设计与合成相应的寡核苷酸片段；(2)核酸外切酶Ⅲ对DNA的剪切；(3)AFB1浓度测定：加入PCR混合液10μL、上下游引物各2μL、水6μL，做实时荧光定量PCR，测定检测样品AFB1浓度下扩增曲线，根据线性方程确定AFB1浓度，线性方程为y＝5.72+1.0415lgC，C代表AFB1的浓度，其中一元线性回归判定系数R2＝0.99，线性范围0.03‑10nM，检测限为0.02nM，信噪比等于3；本发明方法实现黄曲霉毒素B1的简单、快速、高灵敏检测，满足现实生活中对AFB1的检测需求。
基于核酸外切酶荧光分析检测黄曲霉毒素方法

[发明专利]基于核酸适配体技术检测赭曲酶毒素的方法-CN202211019123.0在审
发明人： 朱颖越;陈静怡;李欣怡;李瀚阳;周旋;蒋依轩;沈悦;潘妙婷 -专利权人：常熟理工学院
申请日： 2022-08-24 - 公布日： 2023-04-14 - 主分类号： C12Q1/6876 文献下载
摘要：本发明公开了基于核酸适配体技术检测赭曲酶毒素的方法，其包括以下步骤：(1)设计一段能够对OTA特异性识别的DNA片段及其互补DNA片段，根据此序列来设计实时荧光定量PCR用的上下游引物；(2)核酸外切酶Ⅲ对DNA的剪切：(3)OTA浓度测定：加入PCR混合液10μL、上下游引物各2μL、水6μL，做实时荧光定量PCR，测定检测样品OTA浓度下扩增曲线，根据线性方程确定OTA浓度，线性方程为y＝5.75+1.08lgC，C代表OTA浓度，其中一元线性回归判定系数R2＝0.99，线性范围0.04‑15nM，检测限为0.03nM，信噪比等于3；本发明方法实现赭曲酶毒素的简单、快速、高灵敏检测，满足现实生活中对OTA的检测需求。
基于核酸适配体技术检测赭曲酶毒素方法

[发明专利]一种基于Au@Ag核壳结构比色检测卡那霉素的方法-CN201810859910.3有效
发明人： 朱颖越;姜峰;顾翔源;金梦依;贾睿 -专利权人：常熟理工学院
申请日： 2018-08-01 - 公布日： 2021-04-09 - 主分类号： G01N21/33 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于Au@Ag核壳结构比色检测卡那霉素的方法，包括以下步骤：(1)设计与合成核酸适配体片段；(2)制备Au@Ag核壳结构纳米粒子；(3)取离心管，将浓度为10nM～50nM的核酸适配体和浓度为10nM～50nM的NaCl加入到1500μL的PBS缓冲液中，再加入待测样品，混合并在室温下稳定20min，然后向离心管中加入500μL的纳米溶液，扫描其紫外可见吸收光谱；(4)根据线性方程确定卡那霉素浓度，线性方程为：y＝0.00011x+0.39901；本发明的方法可实现食品中卡那霉素的简易迅速、高灵敏的检测，能够满足实际样品对卡那霉素的检测需求。
一种基于 au ag 结构比色检测卡那霉素方法

[发明专利]一株酿酒酵母及其应用-CN201510257155.8有效
发明人：王立梅;齐斌;朱益波;梁剑光;朱颖越;郑丽雪;姚海霞;丁树慧;陈建 -专利权人：常熟理工学院
申请日： 2015-05-20 - 公布日： 2019-01-11 - 主分类号： C12N1/16 文献下载
摘要：本发明涉及一株酿酒酵母菌株及其应用，其分类命名为Saccharomyces cerevisiaeCS1401，保藏编号为CCTCC NO:M 2015049。本发明的Saccharomyces cerevisiae CS1401菌株发酵生产2,6‑二甲氧基对苯醌的应用是通过该菌株发酵或其游离细胞生物转化小麦胚芽中的对苯醌糖苷，生产2,6‑二甲氧基对苯醌。本发明的酿酒酵母CS1401（Saccharomyces cerevisiaeCS1401）来源于传统自然发酵食品，属于公认安全微生物。该菌株易于培养和保藏，通过发酵小麦胚芽所得2,6‑二甲氧基对苯醌可达699.0µg/g。该发明为提高小麦胚芽的生物利用度提供新途径，具有重要应用前景。
酿酒酵母及其应用

[发明专利]一种确定样品中砷浓度的方法-CN201510482759.2有效
发明人：王立梅;朱颖越;蔡义林 -专利权人：常熟理工学院
申请日： 2015-08-06 - 公布日： 2018-12-25 - 主分类号： C12Q1/6851 文献下载
摘要：本发明涉及一种确定样品中砷浓度的方法，包括：（1）PCR管壁上吸附上链霉亲和素；（2）能够特异性识别砷离子的核酸适配体的5’端进行生物素化修饰，在生物素和链霉亲和素的结合作用下，核酸适配体吸附在PCR管壁上；（3）核酸适配体与互补DNA片段结合；（4）待测样品中的砷离子与核酸适配体结合，导致互补DNA片段与PCR管壁分离；（5）用缓冲液将分离的互补DNA片段冲洗掉；（6）荧光定量PCR，通过检测体系中的Ct值确定砷离子的浓度。本发明设计了一种砷离子生物传感器，用以实现水中砷离子的简单、快速、高灵敏检测。
一种确定样品浓度方法

[发明专利]一种确定样品卡那霉素浓度的方法-CN201510477435.X有效
发明人：王立梅;朱颖越;蔡义林;李彤;蔡珺珂 -专利权人：常熟理工学院
申请日： 2015-08-06 - 公布日： 2018-07-20 - 主分类号： C12Q1/686 文献下载
摘要：本发明涉及一种确定样品卡那霉素浓度的方法，包括：（1）将能够特异性识别卡那霉素的核酸适配体P1和模板DNA片段P混合，P1的3’端碱基与P的3’端互补结合形成P‑P1；（2）待测样品中的卡那霉素与核酸适配体P1结合，使得P1与P分开；（3）加入外切酶Ⅲ，外切酶Ⅲ作用于体系中的P‑P1，将P序列中与下游引物互补端的DNA序列切断，使P不能进行PCR扩增循环，但却不能剪切游离的P，P作为模板在下游引物P2的作用下，进行PCR扩增；（4）通过检测Ct值确定卡那霉素的量。本发明设计了一张卡那霉素生物传感器，用以实现卡那霉素的简单、快速、高灵敏检测。
一种确定样品卡那霉素浓度方法

[发明专利]一株费氏丙酸杆菌菌株及其发酵生产细菌素的方法-CN201510257100.7有效
发明人：郑丽雪;王立梅;齐斌;朱益波;朱颖越;梁剑光;唐亚进 -专利权人：常熟理工学院
申请日： 2015-05-20 - 公布日： 2018-05-22 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明涉及一株费氏丙酸杆菌菌株及其发酵生产细菌素的方法，属于工业微生物技术领域。包括：（1）以Propionibacterium freudenreichii subsp.shermanii作为出发菌株，将其进行原生质体诱变筛选得到一株突变菌株，其分类命名为Propionibacterium freudenreichii CS1420，其保藏编号为CCTCC NO:M 2015050。（2）提供一种通过调节pH来提高新菌株Propionibacterium freudenreichii CS1420产细菌素产量及抑菌活性的新方法。本发明的新菌株Propionibacterium freudenreichii CS1420为安全菌株，该菌株在一定条件下发酵后，发酵液细菌素含量高，可作为天然防腐剂应用于食品和饲料工业中。
一株费氏丙酸杆菌菌株及其发酵生产细菌方法

[发明专利]一株戊糖片球菌及其应用-CN201510257748.4有效
发明人：王立梅;齐曼婷;齐斌;朱益波;郑丽雪;朱颖越;梁剑光;姚海霞;丁树慧;陈建 -专利权人：常熟理工学院
申请日： 2015-05-20 - 公布日： 2018-01-09 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明涉及一株戊糖片球菌及其应用。所述的戊糖片球菌（Pediococcus pentosaceus CS1406）保藏编号为CCTCC NOM 2015169，通过该菌株发酵或其游离细胞生物转化小麦胚芽中的对苯醌糖苷，生产2,6‑二甲氧基对苯醌。本发明的戊糖片球菌（Pediococcus pentosaceus）CS1406来源于传统自然发酵食品，属于公认安全微生物。该菌株易于培养和保藏，通过发酵小麦胚芽所得2,6‑二甲氧基对苯醌为942.1µg/g。该发明为提高小麦胚芽的生物利用度提供新途径，具有重要应用前景。
戊糖球菌及其应用

[发明专利]一种提高大豆分离蛋白膜机械强度的方法-CN201510112059.4有效
发明人：王立梅;齐斌;朱益波;朱颖越;梁剑光;郑丽雪 -专利权人：常熟理工学院
申请日： 2015-03-16 - 公布日： 2017-08-25 - 主分类号： C08J7/04 文献下载
摘要：本发明涉及一种提高大豆分离蛋白膜机械强度的方法。其特征是将大豆分离蛋白（SPI）和季铵盐加入到水中，加热搅拌溶解。真空脱气，倾倒在聚丙烯膜上自然冷却成膜。本发明方法可使大豆分离蛋白膜的机械性能大大提高，充分保证膜的延展性和耐用性。
一种提高大豆分离蛋白机械强度方法

[发明专利]一种基于CD光谱检测技术的铅离子检测方法-CN201610810839.0在审
发明人： 朱颖越;袁爱梦;蔡义林;朱益波;齐斌;张根华 -专利权人：常熟理工学院
申请日： 2016-09-08 - 公布日： 2017-02-22 - 主分类号： G01N21/31 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于CD光谱检测技术的铅离子检测方法，包括以下步骤：(1)设计与合成相应的寡核苷酸片段；(2)金纳米的合成；(3)金纳米二聚体的组装；(4)实际添加样品的测定；本发明的检测方法，可实现水中铅离子的简单、快速、高灵敏检测，满足现实生活中对铅离子离子的检测需求。
一种基于 cd 光谱检测技术离子方法

[发明专利]一种基于增强拉曼光谱效应检测双酚A的方法-CN201610810635.7在审
发明人： 朱颖越;袁爱梦;蔡义林;朱益波;齐斌;张根华 -专利权人：常熟理工学院
申请日： 2016-09-08 - 公布日： 2017-02-22 - 主分类号： G01N21/65 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于增强拉曼光谱效应检测双酚A的方法，包括以下步骤：(1)设计与合成相应的寡核苷酸片段；(2)金纳米星的合成；(3)金纳米星二聚体的组装；(4)实际添加样品的测定；本发明设计两段具有部分互补序列的DNA，将其分别修饰在金纳米星上，使得金纳米星通过碱基互补形成二聚体，然而在BPA会与其中的一条DNA互补结合，使得金纳米星二聚体分离，导致拉曼光谱的变化，同时在拉曼探针分子4‑氨基苯硫酚(4‑ATP)的作用下，体系所产生的拉曼信号的变化较为显著，通过检测信号的变化强度实现对BPA的简单、快速、灵敏检测。
一种基于增强光谱效应检测方法

[发明专利]一种提高大豆分离蛋白膜阻油性能的方法-CN201510112258.5有效
发明人：王立梅;齐斌;朱益波;朱颖越;梁剑光;郑丽雪 -专利权人：常熟理工学院
申请日： 2015-03-16 - 公布日： 2017-02-22 - 主分类号： C08J5/18 文献下载
摘要：本发明涉及一种提高大豆分离蛋白膜阻油性能的方法。其特征是将大豆分离蛋白溶于蒸馏水中，形成悬浮液。在一定温度的水浴中加热搅拌，加入脂肪酸蔗糖酯类，并高速搅拌均匀，形成透明溶液，过滤，脱气。将混合溶液倒在有机玻璃板上流延均匀，水平放置。膜表面成型后，放入烘箱中干燥成膜。本发明方法可使大豆分离蛋白膜阻隔油脂的能力大大提高，能够延缓油脂的迁移和扩散，保证产品质量的稳定。
一种提高大豆分离蛋白油性方法

[发明专利]一种基于核酸外切酶及信号放大功能确定样品中汞离子浓度的方法-CN201510368274.0在审
发明人： 朱颖越;蔡义林;顾晨瑶;邵小敏;王立梅;齐斌 -专利权人：常熟理工学院
申请日： 2015-06-29 - 公布日： 2015-10-28 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明涉及一种基于核酸外切酶及信号放大功能确定样品中汞离子浓度的方法，包括：（1）DNA片段P1和P2的前半段通过碱基互补配对结合成P1-P2复合体；（2）能够对汞离子特异性识别且富含T碱基的DNA片段P和P2的后半段在待测样品中汞离子的作用下，通过形成T-Hg²⁺-T结构相结合；（3）核酸外切酶III从P2的5’端开始逐个剪切P2上的碱基，从而释放出P1和汞离子；（4）P1和血红素结合后催化ABTS盐与双氧水反应；（5）通过检测体系中的吸光值确定汞离子的浓度。本发明设计了一张汞离子生物传感器，用以实现水中汞离子的简单、快速、高灵敏检测。
一种基于核酸外切酶信号放大功能确定样品离子浓度方法

[发明专利]一种基于核酸外切酶Ⅲ的汞离子检测新方法-CN201510382389.5在审
发明人： 朱颖越;邓大庆;朱敏;李海霞;蔡义林;袁爱梦;王立梅;齐斌 -专利权人：常熟理工学院
申请日： 2015-07-02 - 公布日： 2015-09-30 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明涉及一种基于核酸外切酶Ⅲ的汞离子检测新方法，包括（1）将两段能够对汞离子特异性识别且富含T碱基的DNA片段与待测样品混合，两段DNA片段在待测样品中的Hg²⁺作用下结合成3'端闭合的双链DNA；（2）核酸外切酶III酶切双链DNA；（3）对剩余的没有被酶切的DNA片段进行荧光定量PCR扩增；（4）根据荧光检测结果确定Hg²⁺浓度。本发明设计了一张汞离子生物传感器，用以实现水中汞离子的简单、快速、高灵敏检测。
一种基于核酸外切酶离子检测新方法

[发明专利]一种基于纳米金核酸适配体比色检测氯霉素的方法-CN201510312565.8在审
发明人：王立梅;朱颖越;蔡义林;袁爱梦;凌旭;齐斌 -专利权人：常熟理工学院
申请日： 2015-06-10 - 公布日： 2015-08-26 - 主分类号： G01N21/33 文献下载
摘要：本发明涉及一种基于纳米金核酸适配体比色检测氯霉素的方法，包括：（1）将金纳米颗粒、能够对氯霉素特异性识别的核酸适配体和阳离子聚合物混合，阳离子聚合物和核酸适配体形成稳定的复合物；（2）将待测样品和上述混合物混合，待测样品中的氯霉素与核酸适配体形成稳定的发夹结构，释放出阳离子聚合物；（3）金纳米颗粒在阳离子聚合物的作用下团聚成较大颗粒，导致不同波长处的紫外吸收峰强度减弱或增强以及相对应的颜色变化；（4）基于步骤（3）中颜色的变化，确定所述样品中的氯霉素浓度。本发明设计了一种氯霉素生物传感器，用以实现溶液中氯霉素的简单、快速、高灵敏检测。
一种基于纳米核酸适配体比色检测氯霉素方法

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