本发明涉及一种具有高特异性的等温核酸扩增体系，其包括全长Bst DNA聚合酶，并包括嵌入式荧光染料；本发明还涉及一种含有上述等温核酸扩增体系的试剂盒及其在在儿童腹泻病原体检测中的应用，该应用中扩增引物包括如SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.4所示、如SEQ ID NO.5～SEQ ID NO.8所示、如SEQ ID NO.9～SEQ ID NO.12所示的分别用于检测A群轮状病毒、星状病毒、腺病毒的引物组。全长Bst DNA聚合酶具有5'‑3'双链特异性外切酶活性及聚合活性，这一特点被应用于本发明所述的Exo‑NAT方法，并通过向反应体系中加入嵌入式荧光染料配合熔解曲线分析，可实现高特异性、高灵敏性的多重核酸检测，并成功应用于儿童腹泻病原体的精准检测，具有重要的临床意义和广阔的应用前景。
本发明公开了一种检测SARS‑CoV‑2核酸的引物组合物、试剂盒和方法。该引物组合物包括SEQ ID NO：1‑SEQ ID NO：6所示序列的引物，或者包括SEQ ID NO：7‑SEQ ID NO：11所示序列的引物。将含有上述引物组合物的引物液预先装进微流控芯片，组装成试剂盒。利用试剂盒的成分，在该微流控芯片中形成小体积旋转微流控荧光系统对SARS‑CoV‑2核酸进行检测。该引物组合物特异性强、灵敏度高，该试剂盒和方法具有快速高效、操作简便、抗干扰性强、重复性高、鉴定简便的优点，适合于口岸和现场检测。
本发明涉及一种用于检测CALR基因2型突变的引物组合物，其包括含有SEQ ID NO：2‑SEQ ID NO：7所示序列的引物；本发明还涉及一种含有上述引物组合物的试剂盒及其检测方法，以及上述引物组合物扩增的CALR基因2型突变的靶序列，该靶序列为SEQ ID NO：1所示序列。本发明所述的试剂盒及其检测方法具有良好的特异性和稳定性，梯度突变负荷浓度的样本用所建立的LAMP反应体系进行扩增，发现突变负荷检出敏感性可达到3％，几乎与探针法实时PCR的效果相当，且其可对CALR基因2型突变进行可视化检测，与传统的检测方法相比，该方法对设备和环境要求低，检测速度更快，检测灵敏度更高。
