本发明公开了一种乳腺癌相关的甲基化生物标记物的检测试剂盒，其包括有：针对生物标记物cg23035715的选自以下任一组的引物和探针：SEQ ID NO.1‑SEQ ID NO.3，SEQ ID NO.70‑SEQ ID NO.72，SEQ ID NO.139‑SEQ ID NO.141。本发明首先通过独特的多重PCR技术和设计的引物和探针，靶向富集多基因靶向区域，避免多基因检测原始cfDNA量较低的问题，通过结合MethyLight PCR检测的低成本、快捷性，提高了检测通量，同时也提高了模型检测的灵敏度和特异性。单独的分子标记物cg16304215的引物探针的检测结果具有很好的灵敏度，其与其他分子标记物中的任何1个的引物探针组合具有更强、更稳定的诊断能力。通过本发明的所述检测试剂盒，可以很好地提高对乳腺癌检测的灵敏度和特异性，有效提高早期乳腺癌的检出率，及早进行治疗和干预，提高患者生存率。
