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[发明专利]一种透明软骨脱细胞基质复合支架的制备方法-CN202210487580.6有效
发明人：张姝江;白波;谢慧锋;陈艺;姚咏嫦;周伟;钱东阳;郑仕聪 -专利权人：广州医科大学附属第一医院（广州呼吸中心）
申请日： 2022-05-06 - 公布日： 2023-10-10 - 主分类号： A61L27/36 文献下载
摘要：本发明公开了一种透明软骨脱细胞基质复合支架的制备方法。本发明方法制备得到软骨支架的仅适用于软骨修复，采用猪软骨来制备脱细胞软骨海绵基质，含有2型胶原，并保留了大量软骨基质本身的蛋白聚糖成分和生物活性因子，利用动物软骨制备脱细胞胶原基质，能够一定程度上模拟软骨的基本结构；采用壳聚糖作为原料，通过优化使用比例，使支架的力学条件更加稳固，同时具有良好的生物相容性和弹性。本发明不采用交联剂也可以很好的保存脱细胞基质里的活性生物因子，也能具有良好的细胞相容性，构成的支架有较好的孔隙率，利于细胞的三维生长和增殖分化，获得最适宜用于组织工程软骨的复合支架。
一种透明软骨细胞基质复合支架制备方法

[发明专利]一种诱导干细胞定向软骨分化的方法-CN201910859880.0有效
发明人： 姚咏嫦;张廷帅;陈汉政;陈艺;张姝江 -专利权人：广州医科大学附属第一医院（广州呼吸中心）
申请日： 2019-09-11 - 公布日： 2021-06-29 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：本发明属于组织工程技术领域，具体涉及一种诱导干细胞定向软骨分化的方法，基于软骨细胞与干细胞的共培养体系，利用共培养体系使软骨细胞与干细胞分工合作，采用腺病毒载体把转化生长因子TGF‑β3导入软骨细胞，经转染的软骨细胞向干细胞提供持续的、局部的和过表达的TGF‑β3，刺激干细胞定向软骨细胞分化，使TGF‑β3不需要外源添加，从而防止生长因子被蛋白酶分解，并避免基因转染过程中对干细胞可能产生的伤害，保持干细胞更高的存活率与更好的软骨分化的能力。另外，将软骨细胞与干细胞共培养的方式，有助于干细胞在软骨细胞条件培养基中进行定向软骨分化，对生长因子的诱导表现得更敏感，更有助于软骨外基质的分泌。
一种诱导干细胞定向软骨分化方法

[发明专利]一种微囊化hBMP-2/Tet-on系统的构建方法-CN201710686595.4有效
发明人：白波;钱东阳;张姝江;杜秀藩;黄芳立;陈艺;姚咏嫦 -专利权人：广州医科大学附属第一医院
申请日： 2017-08-11 - 公布日： 2021-02-23 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明提供了一种微囊化hBMP‑2/Tet‑on系统的构建方法，包括如下步骤：S1.获取hBMP‑2基因，构建hBMP‑2‑GV347重组质粒；S2.将hBMP‑2‑GV347重组质粒转化、扩增后感染细胞，诱导，使用慢病毒载体进行包装，得到基因转染的BMSCs；S3.使用微胶囊包裹S2中得到的基因转染的BMSCs；本发明将Tet‑On系统与hBMP‑2同时构建于慢病毒载体上，可以提高两个系统的转染效率和表达，更加稳定和持续表达目的基因。转染BMSC后可以在强力霉素的作用下获得BMP‑2蛋白的稳定表达及促进BMSCs向成骨细胞分化。采用含酚基的羧甲基纤维素微囊进行包裹形成复合体，使上述系统在DOX的作用下，能稳定持续的向囊外分泌BMP‑2蛋白；停止使用DOX后，BMP‑2分泌即停止分泌。微囊中BMSCs细胞破囊后依然具备成骨分化能力，且可以在自分泌BMP‑2作用下成骨分化。
一种微囊化 hbmp tet on 系统构建方法

[发明专利]一种仿生胶原膜包被的培养器皿及制备方法-CN201210537068.4有效
发明人：王迎军;翟志臣;姚咏嫦 -专利权人：华南理工大学
申请日： 2012-12-12 - 公布日： 2013-04-24 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种仿生胶原膜包被的培养器皿及制备方法，包括如下步骤：（1）将胶原醋酸溶液与盐缓冲液混合，调整混合液的pH至中性；（2）将步骤（1）的混合液装入培养器皿，于40摄氏度以下保温待胶原重组完成；（3）将步骤（2）得到的含重组胶原的器皿于60摄氏度以下烘干；（4）用超纯水洗步骤（3）得到的胶原层，于60摄氏度以下干燥；（5）重复步骤（4）两次以上直至洗去所有的盐结晶，即得仿生胶原膜包被的培养器皿。通过简单的胶原自组装得到的产品，具有如下优点：胶原与培养器皿贴合紧密，平整度好，抗降解性能好，具有纳米纤维结构，且具有胶原体内独有的67nm周期性螺纹结构。
一种仿生胶原包被培养器皿制备方法