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[发明专利]一种尘螨变应原制备的病毒去除和灭活处理工艺-CN200510036475.7无效
发明人：刘志刚;吉坤美;喻海琼 -专利权人：深圳大学
申请日： 2005-08-11 - 公布日： 2006-04-26 - 主分类号： C12N7/04 文献下载
摘要：本发明涉及一种尘螨变应原浸液制备中的病毒去除和灭活处理工艺。通过一种或多种方法联合去除/灭活病毒。具体的说包括1)干热法：提取过程中所用仪器300℃干烤，培养基及提取用缓冲液80℃加热72小时，病毒灭活用的干热箱至少每半年验证一次。所有操作过程均为严格无菌操作。2)过滤法：用滤膜过滤变应原提取液去除分子量大于100kDa的病毒。3)超声法：将除菌过滤前或除菌分装后的提取液通过可暴露于微波能量的单一环路通道灭活病毒。4)色谱法：用Sephadex S－100分子筛除去分子量大于100kDa的病毒。5)对所有去除和灭活病毒方法均进行验证。
一种尘螨变应原制备病毒去除处理工艺

[发明专利]一种以壳聚糖为佐剂的类变应原舌下含服疫苗的制备方法-CN200510036477.6无效
发明人：刘志刚;冉丕鑫;钟南山;喻海琼;吉坤美 -专利权人：深圳大学;广州医学院
申请日： 2005-08-11 - 公布日： 2006-02-15 - 主分类号： A61K39/39 文献下载
摘要：本发明涉及一种以壳聚糖为佐剂的舌下含服类变应原疫苗的制备方法。本发明应用甲醛与天然提取变应原溶液温和作用，制备类变应原，再以壳聚糖为佐剂制备舌下含服疫苗。具体地说采用生化方法提取并精纯获得天然变应原溶液，将其与甲醛温和作用，制备变应原性大大降低而保留具有T细胞决定簇和免疫原性的类变应原。通过SDS－PAGE检测其生物学特性和竞争性ELISA法检测IgE反应性，免疫动物观察其抗体滴度。将壳聚糖与类变应原混合，制备壳聚糖－类变应原疫苗。同时通过建立小鼠变应原哮喘动物模型，给予壳聚糖类变应原舌下含服干预治疗，证实壳聚糖－类变应原舌下含服疫苗对过敏性哮喘具有治疗作用。
一种聚糖佐剂类变应原舌下疫苗制备方法

[发明专利]一种以纳米粒子为载体制备尘螨变应原疫苗的方法-CN200510033959.6无效
发明人：刘志刚;冉丕鑫;邢苗;钟南山;吉坤美;高波;喻海琼;夏立新;白羽 -专利权人：深圳大学;广州医学院
申请日： 2005-04-07 - 公布日： 2005-12-14 - 主分类号： A61K39/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种以纳米粒子为载体制备尘螨变应原疫苗的方法。尘螨是引起过敏性疾病的主要变应原之一。本发明应用生物可降解的PLGA纳米粒子作为变应原载体，包裹尘螨重组变应原Der p2/Der f2，制成纳米级尘螨变应原疫苗。具体地说采用基因工程技术在大肠杆菌中克隆和表达制备重组Der p2/Der f2蛋白，并采用复乳－溶媒挥发法制备PLGA包裹的纳米粒子。根据溶液外观评分及扫描电镜观测法判断粒子形态，用颗粒分析仪测定纳米粒子的平均粒径。采用BCA法测定纳米粒子的包封率、载药量并绘制纳米粒子体外累积释放曲线。并通过实验证实Der p2/Der f2－PLGA纳米粒子对过敏性哮喘具有治疗作用。
一种纳米粒子载体制备尘螨变应原疫苗方法

[发明专利]一种检测空调滤网和吸尘器灰尘中尘螨变应原的方法-CN200410051395.4无效
发明人：刘志刚;吉坤美;刘晓宇;王广伟;蔡成郁;喻海琼;高波;黄志坚;康敏雄 -专利权人：深圳大学
申请日： 2004-09-09 - 公布日： 2005-05-11 - 主分类号： G01N33/546 文献下载
摘要：过敏性疾病是由于吸入或接触各种变应原引起的，其中，屋尘螨和粉尘螨引起的变应疾病约占70％。本发明运用纳米磁性粒子酶联免疫测定技术检测空调空气过滤网灰尘和吸尘器收集灰尘中尘螨变应原的含量。具体地说通过PBS提取收集的灰尘作为检测样品。分别采用Der p II、Der fII单抗包裹纳米磁性粒子，与待测样品结合，再加入碱性磷酸酶标记的Der p II、Der fII多抗，经温育后形成固相包被的复合物。洗涤、分离后加入底物AMPPD作为化学发光剂，AMPPD在碱性磷酸酶的催化作用下，迅速去磷酸，生产中介体AMPD。AMPD分解后发射光子。通过阅读系统记录发光强度，并从标准曲线上计算出待测样品的浓度。
一种检测空调滤网吸尘器灰尘中尘螨变应原方法

[发明专利]一种诊断过敏性疾病变应原的检验方法-CN200410028106.9无效
发明人：刘志刚;邢苗;喻海琼;吉坤美;高波 -专利权人：深圳大学
申请日： 2004-07-16 - 公布日： 2005-05-11 - 主分类号： G01N33/547 文献下载
摘要：本发明涉及一种新型诊断过敏性疾病变应原的检验方法。通过天然或重组的方法获得尘螨、真菌和花粉等变应原，并包被在磁性纳米粒子。包被蛋白A的磁性纳米粒子与待测病人血清孵育后，血清中的大部分IgG被去除。再将血清加入包被有变应原的磁性纳米粒子，血清中IgE与变应原特异性地结合，加入碱性磷酸酶标记的二抗，经温育后形成固相包被抗体－抗原－酶标记抗体复合物。洗涤、分离后加入底物AMPPD做化学发光剂，AMPPD在碱性磷酸酶的催化作用下去磷酸并生产中介体AMPD，AMPD分解发射光子。通过光量子阅读系统记录发光强度，并从标准曲线上计算出待测抗体的浓度。血清特异性IgE超过100IU/ml的即认为该变应原反应为阳性。
一种诊断过敏性疾病变应原检验方法

[发明专利]防治空调中尘螨的方法-CN200410051394.X无效
发明人：刘志刚;邢苗;喻海琼;吉坤美;高波;李盟;练玉银;包莹;沈作冰 -专利权人：深圳大学
申请日： 2004-09-09 - 公布日： 2005-03-23 - 主分类号： F24F13/28 文献下载
摘要：本发明涉及一种防治空调中尘螨的方法。过敏性疾病是由于吸入或接触各种变应原引起的，其中，屋尘螨和粉尘螨引起的变态反应疾病约占70％。经调查发现空调空气滤网是它们喜好的繁衍环境。本发明运用简单、实用、经济的方法抑制空调空气滤网中尘螨的生长。通过几层复合网起过滤和杀螨的作用，杜绝尘螨在空调中的生长及其变应原对室内空气的污染。吸风口最外层的是耐高温微过滤网，过滤大小在1毫米以上的灰尘颗粒，第二层是不含化学吸附剂的高效过滤网，吸附大小1微米以下的尘螨等变应原。放置在最后一层的是一排网格排步的电加热管，紧贴在第二层上面。在加热70摄氏度10分钟以上的条件下，可完全杀死上面二层的尘螨。
防治空调中尘螨方法

[发明专利]一种检测空调过滤网灰尘中尘螨变应原基因的方法-CN200410028105.4无效
发明人：刘志刚;刑苗;喻海琼;吉坤美;高波;张红云;洪旭;肖勇 -专利权人：深圳大学
申请日： 2004-07-16 - 公布日： 2005-03-23 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明涉及一种检测空调过滤网灰尘中尘螨变应原基因的方法。过敏性疾病是由于各种接触或吸入变应原引起的，其中，尘螨引起的变态反应疾病占70％左右。引起变态反应疾病的尘螨主要包括户尘螨和粉尘螨。经过调查发现空调过滤网也是它们嗜好的栖居场所之一。本发明运用PCR方法检测空调过滤网灰尘中尘螨变应原的基因。具体地说通过玻璃颗粒吸附法等方法提取空调过滤网灰尘中总的微生物基因组DNA作模板，分别设计Der p1和Der f1各两套内外扩增引物进行套式PCR反应或分两步进行PCR，通过扩增出目的片段来检测空调过滤网灰尘中尘螨变应原基因。只需要少量的样品即可检测出空调过滤网灰尘中屋尘螨和粉尘螨变应原基因。
一种检测空调过滤网灰尘中尘螨变应原基因方法

[发明专利]一种基因工程重组技术制备人脑利钠肽的方法-CN200410028107.3无效
发明人：刘志刚;吉坤美;喻海琼;高波;张红云 -专利权人：深圳大学
申请日： 2004-07-16 - 公布日： 2005-03-16 - 主分类号： C12N15/62 文献下载
摘要：本发明涉及一种基因工程重组技术制备人脑利钠肽的方法。通过人工合成人脑利钠肽BNP活性部位32个氨基酸编码区相对应的基因与经突变改造的CMP－3－脱氧－D－甘露一辛酮糖酸合成酶基因3′端融合，中间含肠激酶识别切割位点，该融合基因克隆至甲酵营养型酵母Pichia表达载体获得该融合基因高效表达的工程酵母菌株，该工程菌经发酵后提取层析纯化制备融合蛋白，再经肠激酶切割后分离纯化获得重组人脑利钠肽。该重组肽经体外试验表明具备人脑利钠肽BNP生物活性。
一种基因工程重组技术制备人脑利钠肽方法

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