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[发明专利] 一种耐有机溶剂的褐藻胶裂解酶、其编码基因及应用 -CN202310477142.6 在审
发明人：
周梅先 邵宗泽 ;闫康路 ;王万鹏
- 专利权人：
自然资源部第三海洋研究所
申请日：
2023-04-28
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公布日：
2023-09-26
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主分类号：
C12N15/60 文献下载
摘要： 本发明公开了一种耐有机溶剂的褐藻胶裂解酶、其编码基因及应用。本发明以微泡菌Microbulbifer sp.MCCC 1A19437的基因组DNA为模板，设计并合成引物，通过PCR扩增褐藻胶裂解酶基因，将该基因克隆入pET‑28a(+)表达载体上，在大肠杆菌E.coli BL21中进行诱导表达，采用Ni‑Sepharose亲和层析纯化得到较高纯度的重组褐藻胶裂解酶蛋白。该酶的最适温度为35℃，最适pH为7.5，在0～30℃和pH5.5～10.5范围内稳定性良好；该酶具有良好的耐有机溶剂特性，在测试的浓度为1～30％(v/v)的8种常见有机溶剂中，该酶活力仍保持在59％以上；该酶对海藻酸钠和聚甘露糖醛酸降解效果较好，不能降解聚古洛糖醛酸；该酶降解不同底物的主要产物分别为1～3糖或2～3糖的混合物。该酶在褐藻资源开发利用和特定结构褐藻寡糖制备方面具有优势。一种 有机溶剂 褐藻 裂解 编码 基因 应用
[发明专利] 一种几丁质酶、其编码基因及应用 -CN202110631763.6 有效
发明人：
周梅先 易恩 ;邵宗泽 ;粱小波
- 专利权人：
昆明理工大学 ;自然资源部第三海洋研究所
申请日：
2021-06-07
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公布日：
2023-05-02
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主分类号：
C12N9/42 文献下载
摘要： 本发明公开了一种几丁质酶、其编码基因及应用。本发明以弧菌Vibrio sp.MCCC1A18305的基因组DNA为模板，设计并合成引物，通过PCR扩增几丁质酶基因，将该基因克隆入pET‑22b表达载体上，在大肠杆菌E.coli BL21中进行诱导表达，采用Ni‑Sepharose亲和层析纯化得到较高纯度的重组几丁质酶蛋白。该酶最适pH为6.5，最适温度为50℃，在40～50℃、pH 5.5～6.5范围内酶活性较好；在40℃和45℃下保温12h后酶活力仍无明显降低；Ca2+ 和K+ 对该酶活性具有明显促进作用；该酶对胶体几丁质具有良好的底物特异性，其水解终产物主要是二糖和单糖，是一种外切型几丁质酶，可用于几丁质资源的开发利用和几丁寡糖的制备。一种 几丁质 编码 基因 应用
[发明专利] 一种外切褐藻胶裂解酶、其编码基因及应用 -CN202110202885.3 有效
发明人：
邵宗泽 ;周梅先 陈琳
- 专利权人：
自然资源部第三海洋研究所
申请日：
2021-02-23
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公布日：
2022-08-05
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主分类号：
C12N15/60 文献下载
摘要： 本发明公开了一种外切褐藻胶裂解酶、其编码基因及应用。本发明以弧菌Vibriosp.MCCC 1A13243的基因组DNA为模板，设计并合成引物，通过PCR扩增外切褐藻胶裂解酶基因,将该基因克隆入pET‑22b表达载体上，在大肠杆菌E.coli BL21中进行诱导表达，采用Ni‑Sepharose亲和层析纯化得到较高纯度的重组外切褐藻胶裂解酶蛋白。该酶的最适温度为30℃，最适pH为8.5，在pH4.5～10.0范围内保温30min仍能保持50％以上的相对酶活力；Mn2+ 和Co2+ 对该酶活性具有明显促进作用；该酶对海藻酸钠具有良好的底物特异性，其降解终产物主要是单糖组分，在褐藻资源开发利用方面应用前景良好。一种 外切 褐藻 裂解 编码 基因 应用
[发明专利] 一种内切褐藻胶裂解酶、其编码基因及应用 -CN202110203345.7 有效
发明人：
邵宗泽 ;周梅先 陈琳
- 专利权人：
自然资源部第三海洋研究所
申请日：
2021-02-23
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公布日：
2022-08-05
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主分类号：
C12N15/60 文献下载
摘要： 本发明公开了一种内切褐藻胶裂解酶、其编码基因及应用。本发明以弧菌Vibriosp.MCCC 1A13243的基因组DNA为模板，设计并合成引物，通过PCR扩增内切褐藻胶裂解酶基因,将该基因克隆入pET‑22b表达载体上，在大肠杆菌E.coli BL21中进行诱导表达，采用Ni‑Sepharose亲和层析纯化得到较高纯度的重组内切褐藻胶裂解酶蛋白。该酶的最适温度为35℃，最适pH为8.5，在0～65℃和pH 4.5～10.5范围内稳定性良好；Co2+ 、Cu2+ 、Mn2+ 和Fe3+ 能够明显促进该酶活性；该酶对海藻酸钠降解作用最强，也能降解多聚古洛糖醛酸和多聚甘露糖醛酸，降解这三种底物的主要产物为二糖。该酶在生产褐藻寡糖尤其是褐藻二糖方面具有优势。一种 褐藻 裂解 编码 基因 应用
[发明专利] 一种高温普鲁兰酶及其制备方法与应用 -CN202210289514.8 在审
发明人：
周梅先 邵宗泽 ;闫康路 ;董彬彬
- 专利权人：
自然资源部第三海洋研究所
申请日：
2022-03-23
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公布日：
2022-07-22
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主分类号：
C12N15/56 文献下载
摘要： 本发明公开了一种高温普鲁兰酶及其制备方法与应用。所述的酶序列见SEQ ID NO：2。本发明基于热球菌(Thermococcus sp.MCCC 1A01790)基因组测序数据分析获得普鲁兰酶PulTE基因序列，并对PulTE基因序列进行优化，通过人工合成的方法获得优化后的普鲁兰酶基因序列，并添加酶切位点BamHI和XhoI，将该优化后的基因克隆入pET‑28a(+)表达载体上，在大肠杆菌E.coli Rosette中进行诱导表达，纯化得到较高纯度的重组普鲁兰酶蛋白。该酶最适温度为80℃，在65～80℃条件下比较稳定；该酶具有较宽的pH作用范围，最适pH为6.5；该酶可以水解α‑(1,4)和α‑(1,6)糖苷键，对普鲁兰糖和γ‑环糊精有很强的水解作用，是一种双功能酶，在淀粉资源和普鲁兰糖的加工利用以及麦芽八糖制备方面具有优势。一种 高温 普鲁兰酶 及其 制备 方法 应用
[发明专利] 一种环麦芽糊精酶及其制备方法与应用 -CN202111492517.3 在审
发明人：
邵宗泽 ;周梅先 闫康路 ;董彬彬
- 专利权人：
自然资源部第三海洋研究所
申请日：
2021-12-08
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公布日：
2022-04-29
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主分类号：
C12N9/24 文献下载
摘要： 本发明公开了一种环麦芽糊精酶及其制备方法与应用。所述的酶序列见SEQ ID NO：2。本发明基于喜热厌氧菌基因组测序数据分析获得环麦芽糊精酶CtCD基因序列，并对CtCD基因序列进行优化，通过人工合成的方法获得优化后的环麦芽糊精酶基因序列，并添加酶切位点SacI和XhoI，将该优化后的基因克隆入pET28a‑SUMO表达载体上，在大肠杆菌E.coli Rosette中进行诱导表达，纯化得到较高纯度的重组环麦芽糊精酶蛋白。该酶对三种环糊精(α‑环糊精、β‑环糊精和γ‑环糊精)均有很强的水解作用，该酶可用于制备麦芽六糖、麦芽七糖或麦芽八糖；该酶对致病菌(金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌)的生物膜形成有明显抑制作用，在和抗生素联用治疗生物膜引起的耐药性致病菌感染方面具有良好的应用前景。一种 麦芽 糊精 及其 制备 方法 应用
